- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3937
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-01-20
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3937 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
細(xì)小病毒19探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | Parvovirus B19(PVB19)B19 | LZR3937 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
根瘤菌TSLP (Thymic Stromal Lymphopoietin) ELISA Kit 用途: 固氮
釀酒酵母GHAb (Anti-Growth Hormone Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
土星漢遜酵母NUP153 (Nucleoporin 153kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Hansenula saturnus
雜硅鹽礦物節(jié)桿菌GLUT2 (Glucose Transporter 2) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter siccitolerans
粉紅聚端孢BMG/β2-MG (Beta-2-Microglobulin) ELISA Kit用途: 進(jìn)行分析檢測(cè)及抗病性鑒定,指導(dǎo) 。
消毒燈輻照強(qiáng)度指示卡SEMA3B (Semaphorin 3B) ELISA Kit規(guī)格: 50片
釀酒酵母HNRPA2B1 (Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein A2/B1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
B1速測(cè)卡 GDF15 (Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit 規(guī)格: 5次測(cè)定用量/盒
新疆鹽地桿菌EMMPRIN/CD147 (Extracellular Matrix Metalloproteinase Inducer) ELISA Kit拉丁屬名: Salinibacterium xinjianggense
擴(kuò)展青霉PACAPR (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium expansum
酮丁梭菌OGP (Osteogenic Growth Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Clostridium acetobutylicum
紅色蠟?zāi)?/span>LFA-3 (Lymphocyte Function Associated Antigen 3) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
側(cè)孢短芽孢桿菌PLC (Phospholipase C) ELISA Kit拉丁屬名: Brevibacillus laterosporus
大腸桿菌PS (Plasma Anticoagulant Protein S) ELISA Kit用途: 具有啟動(dòng)子功能的Ps6片段的核苷酸序列Ps6片段中G+C為40.53%,A+T為59.47%
膠孢NF-κB p65 (Nuclear Factor-κB p65) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
細(xì)小病毒19探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 Anti-COX IV-1 細(xì)胞色素c氧化酶IV亞型1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
phospho-DNA PKcs (Thr2609) 英文名稱: 磷酸化DNA依賴性蛋白激酶 0.1ml
禽腦脊髓炎病毒 Anti-AEV 0.1ml
Anti-AT1R/AGTR1/FITC 熒光素標(biāo)記緊張素Ⅱ-1型受體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-FANCG (Ser383) 磷酸化DNA損傷修復(fù)基因XRCC9 規(guī)格 0.1ml
Cripto-1(N-Terminus) 衍化生長(zhǎng)因子抗原(表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽)N端Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA 英文名稱:Human trypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)
C9orf93 英文名稱: 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框93 0.2ml
Anti-PMP22 外周髓鞘蛋白-22Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Human Hypothetical protein LOC677168 ELISA Kit 人假定蛋白LOC677168Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PAX9 配對(duì)盒基因9Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HO-1 血紅素氧合酶 1/熱休克蛋白32 規(guī)格 0.1ml
sP-selectin ELISA Kit 大鼠可溶性P選擇素 96T
PLEKHA7 英文名稱: PLEKHA7蛋白 0.1ml
Caspase-12(hunman) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗原(人)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人抗70(SCL70/topoⅠ)ELISA試劑盒英文名稱:Human anti-scl70 antibody,SCL70/topoⅠELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/T細(xì)胞活化蛋白(TAP)ELISA試劑盒英文名稱:Human transporter associated with antigen processing,TAP ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人抗載脂蛋白A1(Apo A1)ELISA試劑盒 英文名稱:Human anti-apolipoprotein A1 antibody,Apo A1 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)ELISA試劑盒英文名稱:Human proliferating cell nuclear antigen antibody,PCNA ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人抗著絲點(diǎn)(ACA/CENP)ELISA試劑盒英文名稱:Human Anticentromere Antibody,ACA/CENP ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)
Pepsinogen C peptide 胃蛋白酶原C蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
ChAT 英文名稱: ChAT膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶 0.1ml
Anti-Phospho-NMDAR1 (Ser897) 磷酸化谷氨酸受體1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
PGE2(Human Prostaglandin E2) ELISA Kit 人素E2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-EDG2/LPA1 溶血磷脂酸受體蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLHL11 Kelch樣蛋白11 規(guī)格 0.2ml
PI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit 大鼠磷脂酰肌醇IgG/IgM 96T
PTP4A2 英文名稱: 肝再生磷酸酯酶2 0.2ml