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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3938
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-01-20
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3938 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
多殺巴斯德菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Pasteurella multocida | LZR3938 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
大腸埃希氏菌ANGPTL4 (Angiopoietin Like Protein 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
嗜氨酸假諾卡氏菌ASGR1 (Asialoglycoprotein Receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudonocardia alaniniphila
禾谷鐮孢菌*PS (Phosphatidylserine) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium graminearum
嗜酸乳桿菌α Actin (Alpha-Actin) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus acidophilus
棒曲霉EphA2 (Tyrosine protein kinase receptor A2) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus clavatus
枯草芽孢桿菌枯草亞種CDKN2A (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
MarisediminicolaBMP-15 (Bone Morphogenetic Protein 15) ELISA Kit 拉丁屬名: Marisediminicola antarctica
黃絮鱗鵝膏菌SPC (Pulmonary Surfactant Associated Protein C) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
環(huán)狀芽胞桿菌ACA-IgG (Anti-Cardiolipin Antibody IgG) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus circulans
刺孢小克銀漢霉D2D (D-Dimer) ELISA Kit拉丁屬名: Cunninghamella echinulata
褐球固氮菌S100A12 (S100 Calcium Binding Protein A12) ELISA Kit拉丁屬名: Azotobacter chroococcum
油菜菌核病菌CYP1A2 (Cytochrome P450 1A2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
皮狀假絲酵母DKK2 (Dickkopf Related Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida pelliculosa
糞腸球菌LIFR (Leukemia Inhibitory Factor Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: faecalis
白地霉CNTN4 (Contactin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Geotrichum candidum
多殺巴斯德菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Anti-Bassoon 鋅指蛋白231Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Epiphycan 英文名稱： 軟骨素蛋白多糖3 0.2ml
CASPASE3凋亡抑制劑 Anti-Z-DEVD-FMK 0.2ml
Anti-TTF-1/FITC 熒光素標(biāo)記甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1/甲狀腺特異增強(qiáng)子結(jié)合蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IKK alpha (Tyr463) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α 規(guī)格 0.1ml
Trk B 神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
人羰基化蛋白(PC)ELISA試劑盒英文名稱：Human Protein Carbonyl，PC ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
C9orf96 英文名稱： 9號染色體開放閱讀框96 0.2ml
Anti-Phospho-PLK1 (Ser137) 磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
GHRP-Ghrelin(Human growth hormone releasing peptide-Ghrelin) ELISA Kit 人生長激素釋放肽ghrelinMulti-class antibodies規(guī)格： 96T
Anti-Phospho-Stathmin (Ser16) 磷酸化原癌基因蛋白18Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh LAG-3/CD223 淋巴細(xì)胞活化基因-3 規(guī)格 0.2ml
U S-GH(Human Ultra Sensitive growth hormone) ELISA Kit 人超敏生長激素 96T
PPP2R1B 英文名稱： 蛋白質(zhì)磷酸酶2調(diào)節(jié)亞基1B 0.2ml
人糖胺聚糖(GAG)ELISA試劑盒英文名稱：Human glycosaminoglycan，GAG ELISA Kit特價供應(yīng)
人糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒英文名稱：Human glucoprotein 130，gp130 ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒英文名稱：human glycoprotein 49A，Gp49a ELISA Kit特價供應(yīng)
人糖化白蛋白(GA)ELISA試劑盒英文名稱：Human Glycated Albumin，GA ELISA Kit特價促銷
P-cadherin(placental) P-鈣粘附分子抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-ATF4/CREB-2 活化轉(zhuǎn)錄因子4Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ANTXR1(Tyr382) 磷酸化內(nèi)皮標(biāo)志物8 規(guī)格 0.1ml
CHCHD1 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD1 0.1ml
Anti-Phospho-Stathmin (Ser16) 磷酸化原癌基因蛋白18Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
CAM(Human calmodulin) ELISA Kit 人鈣調(diào)素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Phospho-Stathmin (Ser38) 磷酸化原癌基因蛋白18Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Lactoferrin 乳鐵蛋白 規(guī)格 0.1ml
GM-CSF ELISA Kit 大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子 96T
PPP2R1A 英文名稱： 蛋白質(zhì)磷酸酶2調(diào)節(jié)亞基1A 0.2ml
