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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3954
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-01-20
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3954 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
純綠青霉探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Penicillium viridicatum | LZR3954 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
PrauserellaPCP (Procollagen C Peptidase)ELISA Kit拉丁屬名: Prauserella salsuginis sp
蠟狀芽孢桿菌NUP50 (Nucleoporin 50kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型TCR (Tcell Receptor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
少根根霉AChE (Acetylcholinesterase) ELISA Kit拉丁屬名: Rhzopus arrhizus Fisher
欽海特德沃斯氏菌pig GDF6 (Growth Differentiation Factor 6) ELISA Kit 拉丁屬名: Devosia chinhatensis
谷氨酸棒桿菌CKLFSF8 (Chemokine Like Factor Superfamily 8) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
包圍漆斑菌MUC1 (Mucin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Striaticonidium cinctum
巨大球菌屬Aβ1-42 (Amyloid Beta Peptide 1-42) ELISA Kit拉丁屬名: Macrococcus sp.
康氏假單胞菌fFDFT1 (Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas costantinii
硬水黃桿菌NT-ProANP (N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium aquidurense
不動(dòng)桿菌NTRK2 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2 ) ELISA Kit 拉丁屬名: Acinetobacter sp.
動(dòng)物雙歧桿菌乳亞種MAG Ab (Anti-Myelin Associated Glycoprotein Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Bifidobacterium animalis subsp. lactis
黃硬皮馬勃GTF2B (General Transcription Factor IIB) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
豬布魯氏菌TSP-1 (Thrombospondin-1) ELISA Kit拉丁屬名: suis
固氮菌ON (Osteonectin) ELISA Kit 用途: 固氮。
純綠青霉探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格人細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Surface Membrane Immunoglobulin，SmIg ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(CVL)ELISA試劑盒英文名稱：Human cytovillin/ezrin,CVL ELISA Kit特價(jià)促銷
人細(xì)胞色素b561(cytb561)ELISA試劑盒英文名稱：Human lipocalin 2,LCN2 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
PAR4 (protease-activated receptor 4) 蛋白酶活化受體4/細(xì)胞凋亡反應(yīng)蛋白4抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-ATF3 活化轉(zhuǎn)錄因子3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-APC6/CDC16(Ser560) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白16 規(guī)格 0.1ml
Ras 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
c-Abl 英文名稱： 非受體酪酸激酶c-Abl 0.1ml
Anti-N-Ras 原癌基因Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Apo-E(Human Apolipoprotein E) ELISA Kit 人載脂蛋白EMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-HCMV UL49 人巨細(xì)胞病毒UL49蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh KAT13A/SRC1 類固醇受體激活蛋白1 規(guī)格 0.2ml
Human Amebiasis ELISA Kit 人阿米巴 96T
PP14 英文名稱： 胎盤蛋白14 0.1ml
吉姆薩染色液 10ml Sigma原料
VDAC 英文名稱： 等電壓依賴性陰離子通道 0.2ml
Dynamin 1 英文名稱： 酶動(dòng)力蛋白1 0.1ml
Anti-ADAMTS12 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
DERLIN-1 英文名稱： 細(xì)胞膜蛋白Derlin 0.2ml
組織緊張素Ⅱ1型受體 Anti-Agtr1/AT1a 0.1ml
Anti-XBP-1/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
CHES1 英文名稱： CHES1蛋白 0.1ml
Anti-HBsAg 人表面抗原單克隆(檢測(cè))Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
NP-Y(Human neuropeptide Y) ELISA Kit 人神經(jīng)肽YMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-HBcAg 人核心抗原單克隆Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mkl1/MRTF-A myocardin相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子 規(guī)格 0.2ml
PP(Human Pepsin) ELISA Kit 人胃蛋白酶 96T
RAR alpha 英文名稱： 維受體RAR α/RAR α 0.1ml
