- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3956
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-01-20
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3956 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
消化鏈球菌通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | Peptostreptococcus spp. | LZR3956 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
多主葡萄殼菌FTH (Ferritin, Heavy Polypeptide) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
耐鹽枝孢TFF3 (Trefoil Factor 3, Intestinal ) ELISA Kit拉丁屬名: Cladosporium halotolerans
肉桂色鏈霉菌HPR (Haptoglobin Related Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces cinnamonensis
土壤彎孢EP2 (Prostaglandin E Receptor 2 ) ELISA Kit 用途: 研究
維多利亞隱球酵母MUC5AC (Mucin 5 Subtype AC) ELISA Kit拉丁屬名: Cryptococcus victoriae
假單胞菌PDHβ (Pyruvate Dehydrogenase Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas libanensis
阪崎腸桿菌IL-13 (Interleukin 13) ELISA Kit 拉丁屬名: Enterobacter sakazakii
多分枝毛霉LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor ramosissimus
角形小孔菌TAB (Thyroxine Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Microporus quarrei
枯草芽孢桿菌CCND1 (Cyclin-D1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
海仙菌屬LEP (Leptin) ELISA Kit拉丁屬名: Haliea sp.
蟹味菇(白)CLC (Charcot Leyden Crystal Protein) ELISA Kit用途: 食用
異常威克漢姆酵母CCRL1 (Chemokine C-C-Motif Receptor Like Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Wickerhamomyces anomalus
烏魯木齊奇異球菌SEMA4C (Semaphorin 4C) ELISA Kit拉丁屬名: Deinococcus wulumuqiensis
圖畫(huà)大洋芽孢桿菌AXIN2 (Axis Inhibition Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Oceanobacillus picturae
消化鏈球菌通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商Laminin Beta1 peptide 層粘連蛋白β1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-phospho-ALK/CD246 (Tyr1604) 磷酸化間變型激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Abl(Tyr245) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl 規(guī)格 0.1ml
稀釋液 10ml/100ml pH7.2
Versican 英文名稱(chēng): 蛋白聚糖Versican 0.1ml
phospho-DOK1(Tyr362) 英文名稱(chēng): 磷酸化D酪酸激酶衰減蛋白1 0.1ml
Anti-phospho-ALK/CD246 (Tyr1604) 磷酸化間變型激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
CABLES2 英文名稱(chēng): 細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶CABLES2 0.2ml
Anti-GATA-6 GATA結(jié)合蛋白6Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SCF/MGF(Human Stem cell factor/mast cell growth factor) ELISA kit 人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GLUT1 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Goat IgG/APC APC標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格 0.1ml
Alpha-SCA(Human Alpha-sarcomeric actin) ELISA Kit 人α橫紋肌肌動(dòng)蛋白 96T
RCBTB1 英文名稱(chēng): 鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子 0.2ml
Anti-SLC40A1/FPN1/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC40A1IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-p23 (Ser113) 磷酸化端粒酶結(jié)合蛋白P23 規(guī)格 0.1ml
Calponin 1 鈣調(diào)節(jié)蛋白-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
大鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Rat Amylin ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
大鼠胰素樣肽1(Glp-1)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Rat ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Rat alcohol dehydrogenase,ADH ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)
大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Rat aldehyde dehydrogenase,ALDH ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
CHI3L1 英文名稱(chēng): 軟骨糖蛋白39 0.1ml
Anti-IGF I 樣生長(zhǎng)因子IMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
MEC/CCL28(Human mucosae associated epithelia chemokine) ELISA Kit 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GFP 綠色熒光蛋白(免疫組化用)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Guinea pig IgG/APC APC標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
HSP-20(Human Heat Shock Protein 20) ELISA Kit 人熱休克蛋白20 96T
RTP4 英文名稱(chēng): 受體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4 0.2ml