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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3958
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-01-20
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3958 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
奧爾森派琴蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Perkinsus olseni | LZR3958 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
抗生鏈霉菌FBLN5 (Fibulin 5) ELISA Kit用途: 拮抗菌
生黃色鏈霉菌MMP-10 (Matrix Metalloproteinase 10) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces chromoflavus
米曲霉PF4 (Platelet Factor 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus oryzae
鮑姆桑黃GPIIb/IIIa (Platelet Membrane Glycoprotein IIb/IIIa) ELISA Kit拉丁屬名: Sanghuangporus baumii
平臍蠕孢菌SSFA2 (Sperm Specific Antigen 2) ELISA Kit 用途: 研究
亮白曲霉UPP2 (Uridine Phosphorylase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus candidus Link
羅爾夫青霉T4 (Thyroxine) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium rolfsii
扣囊復(fù)膜孢酵母GHRH (Growth Hormone Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomycopsis fibuligera
擬棒形節(jié)叢孢HSF1 (Heat Shock Transcription Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobotrys pseudoclavata
柱隔孢菌PIIINP (N-Terminal Procollagen Ⅲ Propeptide) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
克魯斯假絲酵母IGFBP-7 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 7) ELISA Kit拉丁屬名: Candida krusei
大腸埃希氏桿菌 PSAP (Prosaposin) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
樟疫霉NUP160 (Nucleoporin 160kDa) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
克雷伯氏菌屬PROC (Protein C) ELISA Kit拉丁屬名: Klebsiella sp.
枯草芽胞桿菌PYY (Peptide YY) ELISA Kit用途: 分類 研究
奧爾森派琴蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格轉(zhuǎn)移生長因子–β受體2 Anti-TGF-βR 2 0.1ml
SHFM3 英文名稱： SHFM3蛋白 0.2ml
Yellow fever virus envelope glycoprotein E 英文名稱： 黃熱病毒包膜糖蛋白 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-LATS1 (Ser909) 磷酸化抑制基因LATS1 規(guī)格 0.1ml
OGP (Ostegenic Growth Peptide) 成骨生長肽 (骨生長激素肽)(蛋白多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
EphB6 英文名稱： 酪酸蛋白激酶受體B6 0.1ml
包含氧化還原酶的WW域 Anti-WWOX 0.1ml
CABP5 英文名稱： 鈣結(jié)合蛋白5/3 0.2ml
Anti-Phospho-eIF2 alpha (Ser51) 磷酸化真核啟動因子2αMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Bcl-2 大鼠Bcl-2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Phospho-p56Dok2(Tyr351) 磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Nck1/NCK alpha NCK銜接蛋白1 規(guī)格 0.2ml
Human anti-thrombin receptor,ATR ELISA Kit 人抗凝血酶受體 96T
S100B 英文名稱： S100B蛋白 0.1ml
Anti-Calpain 2 鈣激活的中性蛋白酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh PDGFRA 血小板源性生長因子受體A(PDGFRα) 規(guī)格 0.1ml
Apolipoprotein D 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
TRAIL 英文名稱： 壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體 0.1ml
CEA 英文名稱： 癌胚抗原 0.1ml
Anti-Calpain 2 鈣激活的中性蛋白酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse transforming growth factor α,TGF-α ELISA Kit進(jìn)口/原裝
Chicken IgY 英文名稱： 兔抗雞IgY 1mg
Anti-GATA-5 GATA結(jié)合蛋白5Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
APF(Human anti-perinuclear factor) ELISA Kit 人抗核周因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-IL-28A/IFNL2 白細(xì)胞介素28AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LRRC41 LRRC41蛋白 規(guī)格 0.2ml
HA(Human hemagglutinin) ELISA Kit 人血凝素 96T
Phospho-Rb (Thr826) 英文名稱： 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1 0.1ml
