- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3966
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-01-20
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3966 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
三日探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | Plasmodium malariae | LZR3966 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
鏈格孢GDF9 (Growth Differentiation Factor 9) ELISA Kit 拉丁屬名: Alternaria sp.
哈茨木霉F13 (Coagulation Factor ⅩⅢ) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
滑菇、光帽黃傘CYSLTR1 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Pholiota nameko (Ito) Ito et Imai
橙色綠屈擾菌MAN1A1 (Mannosidase Alpha Class 1A Member 1) ELISA Kit拉丁屬名: Chloroflexus aurantiacus
猴頭APC (Activated Protein C) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
硬水黃桿菌βTG/PBP/CXCL7/NAP2 (Thromboglobulin, Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium aquidurense
白色腥擲孢菌STK39 (Serine/Threonine Kinase 39) ELISA Kit拉丁屬名: Tilletiopsis albescens
副豬嗜血桿菌CK (Creatine Kinase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
水生哈薩克斯坦酵母PGF (Prostaglandin F) ELISA Kit拉丁屬名: Kazachstania aquatica
土生類諾卡氏菌DAO (Diamine Oxidase) ELISA Kit 拉丁屬名: Nocardioides terrigena
頂生腐霉VEGFR-2/KDR (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Globisporangium acrogynum
東方假單胞菌F2 (Coagulation Factor Ⅱ) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas orientalis
釀酒酵母PRG4 (Proteoglycan 4) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
薄層菌APA (Anti-Phospholipid Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Hymenobacter sp.
吐魯番考克氏菌RPL10 (Ribosomal Protein L10) ELISA Kit 拉丁屬名: Kocuria turfanensis
三日探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格ADRB2 英文名稱: 能受體β2/β2-AR 0.1ml
Anti-CD20/MS4A1/PE 熒光素PE標(biāo)記CD20IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IL-1 Beta ELISA Kit 大鼠白介素1βMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ABI1/SSH3BP1/FITC 熒光素標(biāo)記ABI1/SSH3BP1蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Fibulin 1 “衰老關(guān)鍵蛋白” 規(guī)格 0.2ml
MIP-3 Alpha/CCL20(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Alpha) ELISA kit 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α 96T
MMP-20 英文名稱: 基質(zhì)金屬蛋白酶20 0.1ml
CACNB2 英文名稱: L-型電壓依賴型鈣通道β 0.1ml
Anti-Phospho-PKC alpha/beta II (Thr638/641) 磷酸化蛋白激酶C α/β2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
VMA(Human vanillylmandelic acid) ELISA Kit 人垂草扁桃酸Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-MCT1 單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh JMJD7 組蛋白去甲基轉(zhuǎn)移酶JMJD7 規(guī)格 0.2ml
Human schistosoma ELISA Kit 人血吸蟲(chóng) 96T
Paralemmin 1 英文名稱: 細(xì)胞膜調(diào)控蛋白Paralemmin 1 0.2ml
人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒英文名稱:Human Neurotrophin 4,NT-4 ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒 英文名稱:Human neuronal apoptosis inhibitory protein,NAIP ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人蛋白(nephrin)ELISA試劑盒英文名稱:Human Nephrin ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人腎上腺皮質(zhì)(ACA)ELISA試劑盒英文名稱:Human adrenal cortex antibody,ACA ELISA Kit特價(jià)促銷
S100B(S100 calcium binding protein B)(human, mouse, rat, bovine, Rabbit, chicken) S100B蛋白多肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Bcl-xL Bcl-xL蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PHF8 組蛋白賴氨酸去甲基化酶PHF8 規(guī)格 0.2ml
Chloramphenicol 英文名稱: 氯霉素 0.2ml
Anti-Phospho-PERK (Thr980) 磷酸化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-CD14/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記CD14蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CRLR/CALCRL(calcitonin receptor like precursor) 降鈣素受體樣蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
F-肌動(dòng)蛋白 Anti-F-Actin 0.1ml
SLC27A1 英文名稱: 長(zhǎng)鏈脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1 0.2ml
Prickle 英文名稱: 刺痛感蛋白 0.2ml