- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3968
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-01-20
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3968 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Plasmodium spp. | LZR3968 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
枯草芽孢桿菌PRF1 (Perforin 1/Pore-Forming Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
斯氏土地桿菌Gas6 (Growth Arrest Specific Protein 6) ELISA Kit拉丁屬名: Pedobacter steynii
毛栓菌IDE (Insulin Degrading Enzyme) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
盤長(zhǎng)孢狀刺盤孢AKAP1 (A Kinase Anchor Protein 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
土生叢毛單胞菌SMN1(Survival of Motor Neuron 1, Telomeric) ELISA Kit 拉丁屬名: Comamonas terrigena
PFKM (Phosphofructokinase, Muscle) ELISA Kit用途: Produces tuberin. Degrades benzoate (7280).
聚酵素芽孢桿菌GIP (Gastric Inhibitory Polypeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus polyfermenticus
釀酒酵母VIM (Vimentin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
秀珍菇FGF4 (Fibroblast Growth Factor 4) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
雞病毒TGF-β2 (Transforming Growth Factor β2) ELISA Kit拉丁屬名: Infectious bronchitis virus
球孢白僵菌CD30 (Cluster of Differentiation 30) ELISA Kit用途: 生物防治
榆耳D5R/DRD5 (Dopamine Receptor D5) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
香菇Tgtp (T-cell Specific Gtpase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
Thermoactinomyces?GAL (Galanin) ELISA Kit拉丁屬名: Thermoactinomyces? vulgaris
NocardioidesD3R/DRD3 (Dopamine Receptor D3) ELISA Kit 拉丁屬名: Nocardioides liancheng
通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商CD24 英文名稱: CD24 0.1ml
Anti-CD26 CD26Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
HCCR-1(BRI3 binding protein) 人基因/bri3結(jié)合蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD/VECD 上皮型鈣粘附分子Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PARD6B 缺陷性分配同源物β 規(guī)格 0.2ml
BMP2 Kit Human 人 BMP-2 ELISA配對(duì) ELISA
TLR9 英文名稱: Toll樣受體9 0.1ml
CACNB4 英文名稱: L型電壓依賴型鈣通道β4 0.2ml
Phospho-PAK4 (Ser474)/PAK5 (Ser602)/PAK6 (Ser560) 磷酸化p21激活激酶4、5、6Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
3-NT(Human 3-Nitrotyrosine) ELISA Kit 人3-硝基酪氨酸Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Morphine *Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KCNG2 鉀離子通道蛋白亞基2 規(guī)格 0.2ml
EBv IgA(Human epstein-barr virus IgA) ELISA Kit 人EB病毒IgA 96T
Phospho-PDGFRA(Tyr762) 英文名稱: 磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體α 0.1ml
CXCL10/IP-10 CXCL10趨化因子10/干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒英文名稱:Human Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)ELISA試劑盒英文名稱:Human caspase activated deoxyribonuclease,CAD ELISA Kit特價(jià)促銷
人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)ELISA試劑盒英文名稱:Human pan-cytokeratin,P-CK ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人果糖1,6二磷酸醛縮酶(FDA)ELISA試劑盒英文名稱:Human Fructose-1,6-bisphosphate aldolase,FDA ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人過敏毒素/補(bǔ)體片斷4(C4a)ELISA試劑盒英文名稱:Human Complement fragment 4a,C4a ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
MMP-17(Matrix metalloproteinase-17) 基質(zhì)金屬蛋白酶-17抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Chloroplast protease 英文名稱: 葉綠體蛋白酶(植物) 1ml
Anti-GFR Alpha-1 GDNF家族受體α-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Human anti-macrophage antibody ELISA Kit 人抗巨噬細(xì)胞Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-IL-11 白介素11Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAdCAM-1 粘膜定居因子 規(guī)格 0.2ml
LPL(Human lipoprotein lipase) ELISA Kit 人脂蛋白脂酶 96T
RASGRF1 英文名稱: Ras特異性鳥嘌呤核苷酸釋放因子1 0.2ml