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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
黑色普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應商
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3988
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2025-01-20
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3988
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

黑色普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應商

Prevotella melaninogenica

LZR3988

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

毛霉屬CYTH1 (Cytohesin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor sp.

皺褶莫氏黑粉菌CDK7 (Cyclin Dependent Kinase 7) ELISA Kit拉丁屬名: Moesziomyces rugulosus

淺黃色假單胞菌BAFF/CD257/TNFSF13B (B-Cell Activating Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas lurida

植物乳桿菌PC4 (Positive Cofactor 4) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum

燕麥嗜酸菌西瓜亞種*COMP (Cartilage Oligomeric Matrix Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

大果毛殼IL-9 (Interleukin 9) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium megalocarpum

ActinomonosporaCOL6α3 (Collagen Type VI Alpha 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Actinomonospora sp.

炭疽芽胞桿菌AMY1 (Amylase Alpha 1, Salivary) ELISA Kit拉丁屬名:  anthracis

殺鏈霉菌NUP107 (Nucleoporin 107kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces tubercidicus

大腸埃希菌ATA (Angiotensinase A) ELISA Kit拉丁屬名: coli

費氏中華根瘤菌EGR3 (Early Growth Response Protein 3) ELISA Kit 用途: 能與我國栽培大豆共生固氮

毒三素鏈霉菌OVA sIgG (Ovalbumin Specific IgG) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces toxytricini

香氣紅冬孢鎖擲孢酵母bFGF/FGF2 (Basic Fibroblast Growth Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhodosporidiobolus odoratus

阿薩希絲孢酵母CD59 (Protectin) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichosporon asahii

猶他游動放線菌TRF (Transferrin) ELISA Kit拉丁屬名: Actinoplanes utahensis
黑色普雷沃菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應商AXL 英文名稱: 粘附相關激酶 0.1ml

Anti-FLASH/CASP8AP2/FITC 熒光素標記半胱氨酸蛋白酶8相關蛋白2IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Ach ELISA Kit 大鼠乙酰膽堿Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-ACE2/FITC 熒光素標記緊張素轉換酶2IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Fibrinogen gamma chain 人纖維蛋白原γ鏈 規格 0.2ml

PP(Mouse Protein Phosphatase) ELISA Kit 小鼠蛋白磷酸酶 96T

MMP24 英文名稱: 基質金屬蛋白酶-24 0.1ml

Calcyphosine 2 英文名稱: 鈣磷蛋白2 0.2ml

Anti-NRF-1 核呼吸因子-1Multi-class antibodies規格: 0.2ml

LEPR(Human Leptin Receptor) ELISA Kit 人瘦素受體Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-phospho-P53 (Ser33) 磷酸化抑制基因P53Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh HSP27/HspB1/HSP25 熱休克蛋白27 規格 0.1ml

ANNA-2/Ri(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit 人抗神經元核2型/抗Ri 96T

Parkin 英文名稱: 帕金蛋白 0.1ml

小鼠神經生長因子(NGF)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Nerve growth factor,NGF ELISA Kit 特價供應

小鼠神經絲蛋白(NF)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse neurofilament protein,NF ELISA Kit特價供應

COX-2(human) 人素氧化環化酶2Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-CD150/SLAM 信號淋巴細胞活化分子CD150Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh NIPA 間變性激酶核相互作用伴侶蛋白 規格 0.2ml

Human Calreticulin,CRT ELISA Kit 人鈣網蛋白 96T

TRIB2 英文名稱: MAPK調控蛋白TRB2 0.2ml

CHRNA6 英文名稱: 型乙酰膽堿受體α6/AChRα6 0.2ml

Anti-E.coli O6 大腸桿菌埃希桿菌O6(腸致病性大腸桿菌O6)Multi-class antibodies規格: 0.2ml

CSF(Human colony-stimulating factor) ELISA Kit 人集落刺激因子Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-phospho-GAP43(Ser41) 磷酸化神經生長相關蛋白43Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE-Cy7 PE-Cy7標記的鼠抗人IgG單克隆 規格 0.1ml

CLEC4E(Human C-type lectin domain family 4 member e) ELISA Kit 人C型凝集素結構域家族4成員E 96T

phospho-RUNX3(Ser338) 英文名稱: 磷酸化Runx3 0.1ml


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