- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3993
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-01-20
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3993 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
變異變形桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Proteus mirabilis | LZR3993 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
長雙歧桿菌Grb14 (Growth Factor Receptor Bound Protein 14) ELISA Kit 拉丁屬名: Bifidobacterium longum
釀酒酵母FcγR3B (Fc Fragment of IgG Low Affinity IIIb Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Edaphobacter sp.CKLFSF8 (Chemokine Like Factor Superfamily 8) ELISA Kit拉丁屬名: Edaphobacter sp.
根瘤菌屬HbH (Hemoglobin H) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium sp.
膠孢ASGR2 (Asialoglycoprotein Receptor 2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
醋桿菌屬GUCA2A (Guanylate Cyclase Activator 2A) ELISA Kit拉丁屬名: Acetobacter sp.
Corynebacterium variabile corrig. (Müller ) Collins TSP-4 (Thrombospondin-4) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
病研所芽孢桿菌CYSLTR1 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus idriensis
米曲霉平展變種f-Hb (Free Haemoglobin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae var. effusus
姬松茸1號(hào)*PCDHβ16 (Protocadherin Beta 16) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
木霉MLCK/MYLK (Myosin Light Chain Kinase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
尖鐮孢PLA2G4D (Phospholipase A2, Group IV D) ELISA Kit用途: 教學(xué)科研
豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS18CCND2 (Cyclin-D2) ELISA Kit規(guī)格: 1ml
APT (Abnormal Prothrombin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
蘇云金芽胞桿菌以色列亞種PDGF-BB (Platelet Derived Growth Factor-BB) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
變異變形桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Rhesus antibody Rh phospho-CSF1R(Tyr923) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體 規(guī)格 0.1ml
考馬斯亮藍(lán)R-250蛋白快速染色液 250ml 自產(chǎn)
ZNF347 英文名稱: 鋅指蛋白347 0.2ml
DAT1 英文名稱: 神經(jīng)細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子DAT1 0.2ml
PLAUR PLAUR / CD87 / uPAR 鼠單抗 (PE) Human
eEF1A2 英文名稱: 翻譯延伸因子EF-1 α2 0.2ml
α-輔肌動(dòng)蛋白4 Anti-α-ACTN4 0.1ml
Calneuron 1 英文名稱: 鈣營養(yǎng)蛋白1/鈣結(jié)合蛋白8 0.2ml
Anti-eIF4E 真核翻譯起始因子4EMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IGF-1 大鼠樣生長因子-1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ED-1 外胚層Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MYOZ/MYOZ1 MYOZ 規(guī)格 0.2ml
PA-IgM(Human Platelet associated antibody) ELISA Kit 人血小板相關(guān)IgM 96T
SNX7 英文名稱: 分選連接蛋白7 0.2ml
CSFV Polyprotein 英文名稱: 病毒 0.1ml
Anti-Chloramphenicol 氯霉素Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
midnolin isoform Protein 2 中腦核仁蛋白2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD34 CD34Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38 規(guī)格 0.1ml
IL18R1 Kit Mouse 小鼠 IL18R1 ELISA配對(duì) ELISA
TMPRSS5 英文名稱: 跨膜絲酸蛋白酶5 0.2ml
Chromogranin B 英文名稱: 嗜鉻粒素B 0.1ml
Anti-Phospho-NMDAR2B (Tyr1472) 磷酸化谷氨酸受體2BMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Human Pentosidine ELISA Kit 人戊糖素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-LC3A/B 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Ku-80 DNA修復(fù)酶Ku-80 規(guī)格 0.1ml
IGF-1 ELISA Kit 大鼠樣生長因子1 96T
Phospho-Pin1 (Ser16) 英文名稱: 磷酸化肽基脯酞順反異構(gòu)酶Pinl 0.1ml