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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
變形桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3995
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2025-01-20
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3995
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

變形桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Proteus spp.

LZR3995

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

釀酒酵母SYK (Spleen Tyrosine Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

巨大芽孢桿菌 ATP (Thymidine Phosphorylase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus megaterium A de Bary

嗜松青霉GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium pinophilum

腐皮鐮孢GPLD1 (Glycosylphosphatidylinositol Specific Phospholipase D1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

韓國海桿狀菌COL9α3 (Collagen Type IX Alpha 3) ELISA Kit拉丁屬名: Marinobacter koreensis

山原申氏菌LCN2 (Lipocalin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Shinella yambaruensis

泡囊短波單胞菌LTβR (Lymphotoxin Beta Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas vesicularis

黃色刺孢鏈霉菌CA125 (Carbohydrate Antigen 125) ELISA Kit  拉丁屬名: Streptomyces flavospinosporus

孟氏假單胞菌CKMT1B (Creatine Kinase, Mitochondrial 1B ) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas  mandelii

Cecembia sp.PDGFC (Platelet Derived Growth Factor C) ELISA Kit 拉丁屬名: Cecembia sp.

大腸埃希氏菌SDH (Sorbitol Dehydrogenase) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia  coli

球孢白僵菌PLCγ2 (Phospholipase C Gamma 2, Phosphatidylinositol Specific) ELISA Kit用途: 昆蟲防治研究

環圈鏈霉菌MCP-4/CCL13 (Monocyte Chemotactic Protein 4) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces anulatus

球孢白僵菌ERK (Extracellular Signal Regulated Kinase) ELISA Kit用途: 生物防治

斑形葉點霉FⅫa (Activated Coagulation Factor Ⅻ) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
變形桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書phospho-AMPK alpha 2 (Ser491) 英文名稱: 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2 0.1ml

Anti-ARIP2B/FITC 熒光素標記激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2bIgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

MYS(Mouse Myosin) ELISA Kit 小鼠肌球蛋白Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-cdc25A /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠細胞分裂周期蛋白25IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Guinea pig IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的驢抗豚鼠IgG 規格 0.1ml

FSH ELISA Kit 魚促卵泡素 96T

MrpL12 英文名稱: 線粒體核糖體蛋白L12 0.1ml

Calpain 12 英文名稱: 鈣激活蛋白酶12 0.2ml

Anti-Ntn1 軸突導向因子1Multi-class antibodies規格: 0.2ml

M2-PK (Human Pyruvate Kinase) ELISA Kit 人丙酮酸激酶M2型同工酶Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-Phospho-NuMA (Ser395) 磷酸化核有絲分裂器NuMA蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh IFN gamma(F2E4) γ-干擾素單克隆 規格 0.1ml

CRP ELISA Kit 大鼠C反應蛋白 96T

PCDHAC1 英文名稱: 原鈣粘蛋白1 0.2ml

大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA Kit進口/原裝

GRB2/ASH peptide 生長因子受體結合蛋白2抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Oct4 Oct4 鼠單抗 (FITC) Human

Rhesus antibody Rh phospho-CstF64(Ser498) 磷酸化細胞分裂相關蛋白CSTF64 規格 0.1ml

染色液 100ml 自產

ZNF704 英文名稱: 鋅指蛋白704 0.2ml

DCUN1D2 英文名稱: DCN1樣蛋白2 0.2ml

CHURC1 英文名稱: 神經誘導胚胎發育相關蛋白Churchill 0.2ml

Anti-GABABR1 gamma氨基丁酸B型受體1Multi-class antibodies規格: 0.2ml

HGF 小鼠肝細胞生長因子Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-FGF8/HBGF-8 成纖維細胞生長因子8Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標記的小鼠抗兔IgM 規格 0.1ml

ST(Human Serotonin) ELISA Kit 人血清素/血清胺 96T

SPATA3 英文名稱: 生成相關蛋白3 0.2ml


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