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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
饒氏無綠藻探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3999
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2025-01-20
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3999
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

饒氏無綠藻探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Prototheca zopfii

LZR3999

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:

小角狀節皮菌REG1α (Regenerating Islet Derived Protein 1 Alpha) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

金黃桿菌屬PP13 (Placental Protein13) ELISA Kit拉丁屬名: Chryseobncterium  culicis

空腸彎曲桿菌EPCR (Endothelial Protein C Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: jejuni

斯氏油脂酵母PHLDA2 (Pleckstrin Homology Like Domain Family A, Member 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Lipomyces  starkeyi

分枝節桿菌CAPF (Cuticular Active Peptide Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter ramosus

pGAPZBSNCγ (Synuclein Gamma) ELISA Kit拉丁屬名: 宿主:DH5α,BL21

焦曲霉Ub (Ubiquitin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus ustus

潘泰萊里亞島鹽單胞菌PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Halomonas panleriensis

膠孢OIT3 (Oncoprotein Induced Transcript 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

寡養單胞菌TIMP-3 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 3) ELISA Kit用途: 在無機鹽培養基中添加100mg/L的苯甲酸,降解率達40%左右

其他質粒RAPGEF1 (Rap Guanine Nucleotide Exchange Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: 列表1(1周左右)

橄欖產色鏈霉菌EPYC (Epiphycan) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces olivochromogenes

蠟樣芽孢桿菌PPARγC1α (Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma Coactivator 1 Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  cereus

梭狀芽孢桿菌THRα (Thyroid Hormone Receptor Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Clostridium bolteae

釀酒酵母ACTN3 (Actinin Alpha 3) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae
饒氏無綠藻探針法熒光定量PCR試劑盒說明書人抗釀酒酵母(ASCA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody,ASCA ELISA Kit進口/分裝

人抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒英文名稱:Human Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA Kit進口/分裝

人抗凝血酶受體(ATR)ELISA試劑盒英文名稱:Human anti-thrombin receptor,ATR ELISA Kit特價供應

Rho C(Ras homolog gene family member C) RhoC抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Anti-Phospho-Bcl-2 (Ser70) 磷酸化Bcl-2Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh PHKG1 磷酸化酶激酶γ1 規格 0.2ml

Keratin,HMW 濃縮液 0.1ml 進口分裝

Calsequestrin 英文名稱: 肌鈣集蛋白/收鈣素 0.2ml

Anti-LH 促黃體生成素Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Apo-H(Human Apolipoprotein H) ELISA Kit 人載脂蛋白HMulti-class antibodies規格: 48T

Anti-MASP2 甘露聚糖結合凝集素絲氨酸肽酶2Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh KATNA1/Katanin p60 A1 劍蛋白p60亞基A1 規格 0.2ml

Brucella Ab IgG(Human Brucella Antibody IgG) ELISA Kit 人布魯氏菌IgG 96T

PYGM 英文名稱: 肌肉糖原磷酸化酶 0.2ml

大鼠生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA Kit進口/分裝

大鼠生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit特價供應

大鼠生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Angiopoietin 4,ANG-4 ELISA Kit進口/分裝

大鼠生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA試劑盒英文名稱:Rat angiopoietin receptor Tie1,ANG-R-Tie1 ELISA Kit特價促銷

大鼠生長素(ANG)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Angiogenin,ANG ELISA Kit進口/原裝

Anti-TLR11/FITC 熒光素標記Toll樣受體11IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

OGP (Ostegenic Growth Peptide) 成骨生長肽 (骨生長激素肽)(蛋白多肽)Multi-class antibodies規格: 0.5mg

CIDE A 英文名稱: DNA斷裂因子相似蛋白A 0.2ml

Anti-EGF 表皮生長因子Multi-class antibodies規格: 0.1ml

HGF 大鼠肝細胞生長因子Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-Phospho-eIF2 alpha (Ser51) 磷酸化真核啟動因子2αMulti-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mycobacterium human 人結核桿菌菌體蛋白 規格 0.2ml

CG(Human Cryoglobulin) ELISA Kit 人冷球蛋白 96T

Saitohin 英文名稱: Saitohin蛋白 0.2ml

 


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