產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4012 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
隱襲腐霉探針法熒光定量PCR試劑盒供應商 | Pythium insidiosum | LZR4012 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:
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Brenneria nigrifluensGRN (Granulin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
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細極鏈格孢IL-16 (Interleukin 16) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
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生芽紅細菌LFA-2/CD2 (Lymphocyte Function Associated Antigen 2) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodobacter blasticus
梨生囊殼孢CgB (Chromogranin B) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種PLAP/ALPP (Placental Alkaline Phosphatase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
乳桿菌屬AP36 (Apelin 36) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus sp.
豬鏈球菌(不可提供)M-AChR M2 (Muscarinic Acetylcholine Receptor M2) ELISA Kit拉丁屬名: suis
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Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的羊抗人IgG 規格 0.1ml
Human c-sis ELISA Kit 人c-sis 96T
NBL1 英文名稱: 神經母細胞瘤抑瘤蛋白1 0.1ml
CAPD2 英文名稱: 染色體相關蛋白2 0.2ml
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Alpha1-AT(Human Alpha1-Antitrypsin) ELISA Kit 人α1抗胰蛋白酶Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-NIPP1/ARD1 核抑制蛋白磷酸酶1Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IMPDH2 5'肌苷磷酸脫氫酶2 規格 0.2ml
AnuA-IgG(Human anti-nucleosome antibody IgG) ELISA Kit 人抗核小體IgG 96T
PHD3 英文名稱: 脯酸羥化酶 0.2ml
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C8orf42 英文名稱: 8號染色體開放閱讀框42 0.2ml
Anti-CK15 細胞角蛋白15Multi-class antibodies規格: 0.2ml
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小鼠淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit進口/原裝
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CK II beta 英文名稱: 絲/蘇酸蛋白激酶II β(casein kinase IIβ) 0.1ml
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NR1/NMDAR1/GLUR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1) 谷氨酸受體1抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-ARHI ARHI蛋白Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-ATG1(Ser556) 磷酸化自噬相關蛋白1 規格 0.1ml
鼠兔通用SP(AP)試劑盒 140片 進口原料
phospho-SLAMF1 (Tyr281) 英文名稱: 磷酸化信號淋巴細胞活化分子CD150 0.1ml