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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
野牛奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3915
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2025-01-17
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3915
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

野牛奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Ostertagia bisonis

LZR3915


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

鏈霉菌屬SIGLEC3 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces  sp.

枯草芽孢桿菌CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis

侵蝕侏儒囊菌MIP-5 (Macrophage Inflammatory Protein 5) ELISA Kit 拉丁屬名: Nannocystis exedens

釀酒酵母CA1 (Carbonic Anhydrase I) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

地衣芽孢桿菌Cx (Connexin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  licheniformis

枯草芽孢桿菌MIP-3β/ELC/CCL19 (Macrophage Inflammatory Protein 3β) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis

蜂房類芽孢桿菌C-P (C-Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus alvei

紅法夫酵母SOD3 (Superoxide Dismutase 3, Extracellular) ELISA Kit拉丁屬名: Phaffia rhodozyma

CitricoccusGDF2 (Growth Differentiation Factor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Citricoccus zhacaiensis

根瘤菌屬PRELP (Proline Arginine Rich End Leucine Rich Repeat Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium  alkalisoli

沙針擬盤多毛孢NOX5 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 5) ELISA Kit拉丁屬名: Pestalotiopsis osyridis

傘菌假單胞菌GAL4 (Galectin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas agarici

釀酒酵母CLA (Collagen Autoantibody) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

枯草芽孢桿菌枯草亞種NA/NE (Noradrenaline/Norepinephrine) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis subsp. subtilis

炭黑曲霉CDK2 (Cyclin Dependent Kinase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus carbonarius
野牛奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Apolipoprotein E 英文名稱: 載脂蛋白E 0.1ml

Anti-phospho-Bim(Ser69) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化細胞死亡調解子IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

IL-3(Mouse Interleukin 3) ELISA Kit 小鼠白介素3Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-CCP/FITC 熒光素標記兔抗瓜氨酸環肽IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh EDG3 內皮分化型G蛋白偶聯受體3 規格 0.2ml

I CTP ELISA Kit 大鼠Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽 96T

MRP8+MRP14 英文名稱: 多藥耐藥相關蛋白8/9/14 0.2ml

C9ORF43 英文名稱: 9號染色體開放閱讀框43 0.2ml

Anti-OAT-3 陰離子轉運蛋白-3Multi-class antibodies規格: 0.2ml

iNOS(Human inducible nitric oxide synthase) ELISA KIT 人誘導型一氧化氮合成酶Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-OAT-1/SLC22A6 陰離子轉運蛋白-1Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh IFI78/MX1 干擾素誘導蛋白P78 規格 0.1ml

GP-MM(Mouse Glycogen phosphorylase MM)ELISA Kit 小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM 96T

PCDHA8 英文名稱: 原鈣粘附蛋白α8 0.2ml

beta-Amyloid(25-35) 英文名稱: β淀粉樣肽(25-35) 0.1ml

Anti-Tie2 生成素受體2Multi-class antibodies規格: 0.1ml

sPLA2 (Rat secreted phospholipase A2,sPLA2) ELISA Kit 大鼠分泌型磷脂酶A2Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-Stra8 視黃酸激活基因8Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的羊抗人IgG 規格 0.1ml

LDL-IC ELISA Kit 大鼠免疫復合物 96T

NCKAP1L 英文名稱: 造血蛋白1 0.2ml

CFDP1 英文名稱: 顱面部發育蛋白1 0.2ml

Anti-MMP-15 基質金屬蛋白酶-15Multi-class antibodies規格: 0.1ml

PWM(Human poke* mitogen) ELISA Kit 人美洲商陸素Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-MBP 髓鞘堿性蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh KAT4 細胞周期基因1蛋白 規格 0.1ml

CYT Ab(Human Cysticercosis antybody) ELISA Kit 人囊蟲病 96T

PHKG2 英文名稱: 磷酸化酶激酶γ2 0.2ml

 


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