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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
豬腺病毒探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3976
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2025-01-17
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3976
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

豬腺病毒探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商

Porcine Adenovirus(Swine Adenovirus)

LZR3976

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

牛布魯氏菌病間接ELISA抗體檢測試劑盒PCPE1 (Procollagen C Proteinase Enhancer 1 ) ELISA Kit 規(guī)格: 96孔板*2塊板

褐色馬勃Salusin α (Salusin Alpha) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

戊糖乳桿菌ApoE (Apolipoprotein E) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus  pentosus

雅致小克銀漢STAT2 (Signal Transducer and Activator of Transcription 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Cunninghamella elegans

雙鞘不黏柄菌Methylase ELISA Kit拉丁屬名: Asticcacaulis biprosthecium

擬莖點霉CD3d (Cluster of Differentiation 3d) ELISA Kit 拉丁屬名: Diaporthe sp.

巨型艾美耳球蟲SOD1 (Superoxide Dismutase 1, Soluble) ELISA Kit拉丁屬名: maxima

亞熱帶細小鏈孢菌α1-AGP (Alpha-1-Acid Glycoprotein) ELISA Kit

拉丁屬名: Catenulispora subtropica

金黃色葡萄球菌CX3CR1 (Chemokine C-X3-C-Motif Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Staphylococcus aureus

溜曲霉C/EBPβ (CCAAT/Enhancer Binding Protein Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus tamarii

臺灣根霉S100A11 (S100 Calcium Binding Protein A11) ELISA Kit  拉丁屬名: Rhizopus  formosensis

肉糜  鵝源性成分(定性)FG (Fibrinogen) ELISA Kit拉丁屬名: 肉糜  鵝源性成分(定性)

淡紫擬青霉MUC7 (Mucin 7) ELISA Kit用途: 用作生物防治研究

皮落青霉CAMK2α (Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium crustosum

杏鮑菇EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
豬腺病毒探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商Claudin 22 英文名稱: 緊密連接蛋白22 0.1ml

Anti-Connexin-32 間隙連接蛋白32Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

E7 protein/HPV 16 (Human papillomavirus type 16) 人瘤病毒16型E7蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-CXCR7/RDC1 細胞表面趨化因子受體7Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PAX8 配對盒基因8 規(guī)格 0.1ml

SERPINF2 Kit Mouse 小鼠 SerpinF2 ELISA配對 ELISA

TNFRSF19 英文名稱: 壞死因子配體超家族成員19 0.1ml

CADPS2 英文名稱: 鈣依賴分泌激活蛋白2/的相關(guān)蛋白 0.2ml

Anti-Leptin 瘦素Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Serpina3g(Human serine/cysteine peptidase inhibitor clade A member 3G) ELISA Kit 人絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝3GMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-PAR-1/Thrombin receptor 蛋白酶激活受體-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh HOXB5 同源盒蛋白HOXB5 規(guī)格 0.1ml

IL-1 Beta ELISA Kit 大鼠白介素1β 96T

Phospho-PLC beta3 (Ser1105) 英文名稱: 磷酸化磷酯酶Cβ3 0.1ml

Rhesus antibody Rh PACAP-27/38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27/38 規(guī)格 0.1ml

MEP1A Kit Mouse 小鼠 MEP1A ELISA配對 ELISA

TPOR 英文名稱: 血小板生成素受體 0.1ml

CHL1 英文名稱: 神經(jīng)細胞粘附分子CALL 0.2ml

Anti-CD34 CD34Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Methemoglobin,MHB ELISA Kit特價供應(yīng)

豬睪酮(T)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Testoterone,T ELISA Kit進口/分裝

Chondrocalcin 英文名稱: Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素 0.1ml

Anti-GLUR3/GRIA 3 谷氨酸受體3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

SK(Human Streptokinase) ELISA Kit 人鏈激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-NGF-beta 神經(jīng)生長因子-βMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh IL-17B 白介素-17B 規(guī)格 0.1ml

IL-2sR Beta ELISA Kit 大鼠白介素2可溶性受體β鏈 96T

phospho-PTPN7 (Ser93) 英文名稱: 磷酸化非受體型蛋白酪酸磷酸酶7 0.1ml


聯(lián)系方式
手機:13482402338
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