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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
鼻疽假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR4007
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2025-01-17
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR4007
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

鼻疽假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Pseudomonas mallei

LZR4007

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

稻梨孢MSTN (Myostatin) ELISA Kit拉丁屬名: Pyricularia  oryzae

玫煙色棒束孢DBP (Vitamin D Binding Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Isaria fumosorosea

香菇屬CGRP (Calcitonin Gene Related Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Lentinula  sp.

海綿假單胞菌TG (Thyroglobulin) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas pachastrellae

水稻腸桿菌TLN (Talin) ELISA Kit拉丁屬名: Enterobacter oryzae

阿利坎特港富鹽菌ANG I (Angiotensin I) ELISA Kit拉丁屬名: Haloferax lucentensis

米曲霉LN (Laminin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  oryzae

ThermobifidaSEMA4C (Semaphorin 4C) ELISA Kit拉丁屬名: Thermobifida  halotolerans

耐賴氨酸芽孢桿菌LRP (Lung Resistance-Related Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Lysinibacillus boronitolerans

釀酒酵母PDGFRα (Platelet Derived Growth Factor Receptor Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

光滑青霉TDT (Terminal Deoxynucleotidyl Transferase) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium glabrum

嗜熱鏈球菌PKBG (Protein Kinase B Gamma) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptococcus  thermophilus

pBV220CA5B (Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial) ELISA Kit規格: 1ml甘油管1支,20ul質粒,一般次日下午

黃柄曲霉FcaR (Fc Fragment of IgA Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus flavipes

紅細菌COL14 (Collagen Type XIV) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodobacter sp.
鼻疽假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Anti-ATXN1 失調癥蛋白1Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-alpha Adducin(Ser726) 磷酸化內收蛋白a1 規格 0.1ml

Neurofilament 神經絲蛋白 濃縮液 0.1ml 進口分裝

URP2 英文名稱: 整合素結合性信號分子 0.1ml

DAP5 英文名稱: 死亡相關蛋白5 0.1ml

Anti-ATXN1 失調癥蛋白1Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Etv5 英文名稱: 轉錄因子Ets差異基因5 0.2ml

CAMKK2 英文名稱: 鈣調蛋白激酶激酶β 0.1ml

Anti-EDG2/LPA1 溶血磷脂酸受體蛋白1Multi-class antibodies規格: 0.2ml

MYD88(Human myeloid differentiation primary response gene 88) ELISA Kit 人髓樣分化因子初次應答基因88Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-PAX2 配對盒基因2Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh HORMAD2 異質核糖核蛋白U2樣蛋白 規格 0.2ml

S-100 ELISA Kit 大鼠S100蛋白 96T

PTP1B 英文名稱: 蛋白酪酸磷酸酶-1B 0.1ml

beta-Amyloid 1-42(CT) 英文名稱: β淀粉樣肽/Aβ42 0.1ml

Anti-CD137/TNFRSF9/FITC 熒光素標記CD137IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

IGF-1 ELISA Kit 大鼠樣生長因子1Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-BAFFR/Tnfrsf13c/CD268/FITC 熒光素標記B細胞活化因子受體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh ET-1(2C4) 內皮素-1單克隆 規格 0.2ml

sCKR(Human soluble cytokine receptor) ELISA Kit 人可溶性細胞因子受體 96T

MSK1 英文名稱: 有絲分裂原和應激活化型蛋白激酶1 0.2ml

CIRBP 英文名稱: 冷誘導RNA結合蛋白 0.2ml

Anti-phospho-P53 (Thr18) 磷酸化抑制基因P53Multi-class antibodies規格: 0.1ml

MLKL(Human mixed lineage kinase domain-like) ELISA Kit 人混合系列蛋白激酶樣結構域Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-Paxillin 樁蛋白PaxillinMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh hnRNP R 異質性核糖核蛋白R 規格 0.2ml

AMA IgA(Human anti-myelin antibody IgA) ELISA Kit 人抗髓磷脂IgA 96T

PCDHB6 英文名稱: 原鈣粘附蛋白β6 0.1ml


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