- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4033
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-19
- 更新日期: 2025-01-17
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4033 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
里氏立克次氏體探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | Rickettsia risticii | LZR4033 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
膨大彎頸霉F11 (Coagulation Factor XI) ELISA Kit 拉丁屬名: Tolypocladium inflatum
蠟狀芽孢桿菌MMP-2 (Matrix Metalloproteinase 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus cereus
釀酒酵母FBG (Fibrinogen) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
大腸埃希氏菌HMGCS1 (3-Hydroxy-3-Methylglutaryl-Coenzyme A Synthase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
變幻青霉CASP7 (Caspase 7) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium variabile
MicromonosporaSp17 (Sperm Protein 17) ELISA Kit 拉丁屬名: Micromonospora coxensis
綠色木霉菌CFB (Complement Factor B) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichoderma viride
Klebsiella pneumoniaeLDHA (Lactate Dehydrogenase A) ELISA Kit 拉丁屬名: Klebsiella pneumoniae.
皺褶莫氏黑粉菌αHSP (Alpha-Hemoglobin Stabilizing Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Moesziomyces rugulosus
平菇DAP6 (Death Associated Protein 6) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
雅致枝霉DSE (Dermatan Sulfate Epimerase) ELISA Kit拉丁屬名: Thaminidium elegans Link ex Gary
苔草草拉氏桿菌*TMSβ10 (Thymosin Beta 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Rathayibacter caricis
球毛殼菌(可訂購(gòu))DT (Dopachrome Tautomerase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
異常漢遜酵母異常變種SOX1 (Sex Determining Region Y Box Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Hansenula anomala var. anomala
腐皮殼屬MK (Midkine) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
里氏立克次氏體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 大鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1,VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
大鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2,VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
HA tag HA tag標(biāo)簽多肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TFRC Transferrin Receptor / TFRC / CD71 兔單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser339) 磷酸化原癌基因c-Raf 規(guī)格 0.1ml
兔抗親和素純化 1mg/10mg 國(guó)產(chǎn)
YES1 英文名稱: 原癌基因酪酸蛋白激酶Yes1 0.1ml
CARD7 英文名稱: 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白7 0.1ml
Anti-envelope glycoprotein (Yellow fever virus) 黃熱病毒包膜糖蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
progesterone 大鼠孕酮Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-EGFR(Tyr1068) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MYL7 肌球蛋白輕鏈7 規(guī)格 0.2ml
C4b(Human Complement fragment 4b) ELISA Kit 人補(bǔ)體片斷4b 96T
SALL4 英文名稱: 鋅指轉(zhuǎn)錄蛋白Sall4 0.2ml
β-抑制蛋白2 Anti-β-arrestin 2 0.1ml
Anti-TRF/Gold 金離子標(biāo)記抗轉(zhuǎn)鐵蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.5ml(15nm)
Rhesus antibody Rh phospho-eIF4EBP1(Thr36) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1 規(guī)格 0.1ml
rhEGF(rh-Epidermal growth factor) 重組人表皮生長(zhǎng)因子Multi-class antibodies規(guī)格: 100ug
大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒 英文名稱:Rat Eotaxin 1 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒英文名稱:Rat eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA Kit進(jìn)口/分裝
大鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒英文名稱:Rat eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit進(jìn)口/原裝
CKI gamma 3 英文名稱: 酪蛋白激酶1γ3/CKI γ3 0.2ml
Anti-Ephrin B Ephrin BMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
MIP-5 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-5Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-EAAT1/Glast 膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸運(yùn)載蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Nadrin 神經(jīng)細(xì)胞發(fā)育相關(guān)調(diào)控蛋白 規(guī)格 0.2ml
TCR(Human T cell receptor) ELISA Kit 人T細(xì)胞受體 96T
SECTM1 英文名稱: 分泌和跨膜蛋白1 0.1ml