產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4049 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
海德堡沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Salmonella heidelberg | LZR4049 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
灰棕褐鏈霉菌CFI (Complement Factor I) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces griseobrunneus
枯草芽孢桿菌Gal-6S (Galactose-6-Sulphatase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
間型小克銀漢霉NPHN (Nephrin) ELISA Kit拉丁屬名: Cunninghamella intermedia
土曲霉C4a (Complement Component 4a) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
立枯絲核菌SSFA2 (Sperm Specific Antigen 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
吸水鏈霉菌紫色變種EGR1 (Early Growth Response Protein 1) ELISA Kit 用途: 模式菌株
豇豆慢生根瘤菌F5 (Coagulation Factor V) ELISA Kit用途: 與綠豆花生共生固氮
釀酒酵母PLC (Phospholipase C) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
糙皮側耳CLDN11 (Claudin 11) ELISA Kit 拉丁屬名: Pleurotus ostreatus
運動節桿菌TR (Targeted Ribonuclease) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter agilis
棲土光黑殼IκBα (Inhibitory Subunit of NF Kappa B Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Preussia terricola
秦氏蜜環菌HTRA1 (HtrA Serine, Peptidase 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
短小芽孢桿菌SMM (Smooth Muscle Myosin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus pumilus
釀酒酵母SOD3 (Superoxide Dismutase 3, Extracellular) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
灰(色)大孢鏈霉菌ApoC3 (Apolipoprotein C3) ELISA Kit用途: 分類
海德堡沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 CAD(Caspase-Activated Deoxyribonuclease) Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
大鼠生長激素(GH)ELISA試劑盒英文名稱:Rat growth hormone,GH ELISA Kit特價促銷
大鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit特價供應
大鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒 英文名稱:Rat growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA Kit 進口/原裝
大鼠生長抑素(SS)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Somatostatin,SS ELISA Kit進口/分裝
大鼠視黃醇結合蛋白(RBP)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Retinol-binding protein,RBP ELISA Kit進口/原裝
A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人病毒H1N1-M2蛋白多肽Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Caspase 4+Caspase 11 英文名稱: 半胱胺酸蛋白酶4/11 0.1ml
Anti-Endo G 核酸內切酶GMulti-class antibodies規格: 0.1ml
ANG 大鼠緊張素Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-DOK2 D酪氨酸激酶衰減蛋白2Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NCK2/Nck beta NCK銜接蛋白2 規格 0.2ml
Human thrombin receptor,TR ELISA Kit 人凝血酶受體 96T
Sema3C 英文名稱: 跨膜蛋白Sema3C 0.2ml
人法尼基二磷酸法尼基轉移酶1(FDFT1)ELISA試劑盒 英文名稱:Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1,FDFT1 ELISA Kit特價促銷
人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒 英文名稱:Human ReverseTri-iodothyronine,rT3 ELISA Kit進口/分裝
人泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Ubiquitin,Ub ELISA Kit特價供應
人泛素蛋白D(UBD)ELISA試劑盒英文名稱:human ubiquitin D,UBD ELISA Kit進口/原裝
NF-κBp50(p50 NF-kappa B;p50NFKB) 細胞核因子50/κ基因結合核因子50抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-APOH 載脂蛋白HMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATXN1(Ser775) 磷酸化失調癥蛋白1 規格 0.1ml
Classical swine fever virus 英文名稱: 病毒 0.2ml
Anti-IL-6 白介素6Multi-class antibodies規格: 0.1ml
MAG Ab(Human anti-myelin associated glycoprotein antibody) ELISA Kit 人抗髓鞘相關糖蛋白Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-IKK beta KB抑制蛋白激酶βMulti-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAGED1 相關抗原D1 規格 0.2ml
OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit 人氧化 96T
RCCD1 英文名稱: RCCD1蛋白 0.1ml