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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4058
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-19
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4058 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
圣保羅沙門(mén)氏菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | Salmonella saintpaul | LZR4058 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
哈茨木霉α1ACT (Alpha1 Antichymotrypsin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
金色橫裂鏈霉菌HSF2 (Heat Shock Transcription Factor 2) ELISA Kit 用途: 代謝產(chǎn)物具有活性。
松鼠葡萄球菌c-myc (c-myc Oncogene Product) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus sciuri
芽胞桿菌PYGB (Glycogen Phosphorylase, Brain ) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus sp.
Acinetobacter dpudoroffii sp.ATF-5 (Activating Transcription Factor 5) ELISA Kit拉丁屬名: Acinetobacter dpudoroffii sp.
大孢長(zhǎng)根菇M-AChR M1 (Muscarinic Acetylcholine Receptor M1) ELISA Kit用途: 藥用菌
熒光假單胞桿菌L1CAM/CD171 (L1-Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
金針菇RND1 (Rho Family GTPase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Collybia velutipes (Curt.: Fr.) Quél.
香味類(lèi)香味菌MUC3 (Mucin 3) ELISA Kit拉丁屬名: Myroides odoratus
灰樹(shù)花孔菌PP14 (Placental Protein14) ELISA Kit拉丁屬名: Grifola frondosa
柳府皮殼菌KAF (Keratinocyte Autocrine Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Valsa salicina
布魯氏菌病犬型試管凝集試驗(yàn)抗原TRF (Transferrin) ELISA Kit規(guī)格: 5ml
深綠木霉CCND1 (Cyclin-D1) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma atroviride
大腸埃希氏菌LOXL4 (Lysyl Oxidase Like Protein 4 ) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
亞瓦派部落奇異球菌D3R/DRD3 (Dopamine Receptor D3) ELISA Kit 拉丁屬名: Deinococcus yavapaiensis
圣保羅沙門(mén)氏菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格IAA/BSA 吲哚-3-乙酸偶聯(lián)血清白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 5mg
Anti-ABL2 ABL2蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-c-Fos (Ser32) 磷酸化c-fos 規(guī)格 0.1ml
兔抗羊IgG血清 0.5ml 國(guó)產(chǎn)
WIPF2 英文名稱(chēng)： WASP結(jié)合蛋白 0.2ml
DARPP32 英文名稱(chēng)： 多巴胺、cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白 0.2ml
Anti-ABL2 ABL2蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Caspase-6 (CT) 英文名稱(chēng)： 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(C端) 0.1ml
Anti-CCL23/MIP3 巨噬細(xì)胞炎性蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
OIT3(human oncoprotein induced transcript 3) ELISA Kit 人癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Beta-HCG 人β亞基人絨毛膜激素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MIRK/Dyrk1B 雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶1B 規(guī)格 0.2ml
GSTpi(Human glutathione S-transferases0 ELISA Kit 人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi基因 96T
RNF215 英文名稱(chēng)： 環(huán)指蛋白215 0.2ml
CRHR2 英文名稱(chēng)： 促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體2 0.1ml
Anti-CDK9 周期素依賴(lài)性激酶9Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依賴(lài)性激酶4(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml
Anti-CCL16/HCC-4 巨噬細(xì)胞炎性蛋白16Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCDHA1 原鈣粘附蛋白α1 規(guī)格 0.2ml
CR2 Kit Human 人 CD21 / C3DR ELISA配對(duì) ELISA
TIM4 英文名稱(chēng)： T淋巴細(xì)胞膜蛋白4 0.1ml
Claudin 4 英文名稱(chēng)： 緊密連接蛋白4 0.1ml
Anti-N-cadherin N-鈣粘附分子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
PLC(Human Phospholipase C) ELISA Kit 人磷酯酶CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-NCoR2 核受體輔助抑制因子2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-5 白細(xì)胞介素5 規(guī)格 0.1ml
PF/PFP(Mouse Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit 小鼠穿孔素 96T
phospho-PAK1/2/3(Thr423) 英文名稱(chēng)： 磷酸化p21激活激酶1/2/3 0.1ml
