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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4076
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-19
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4076 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
小蛇菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Serpulina spp. | LZR4076 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
枯草芽孢桿菌GSK3β (Glycogen Synthase Kinase 3 Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
釀酒酵母Gas6 (Growth Arrest Specific Protein 6) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
匍匐曲霉COL7 (Collagen Type VII) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus repens
日本玉蕈IL-1R2 (Interleukin 1 Receptor Type II) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
枯斑擬盤多毛孢FGα (Fibrinogen Alpha) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
側(cè)柄褐孔菌TECK/CCL25 (Thymus Expressed Chemokine) ELISA Kit 拉丁屬名: Fuscoporia discipes
桃紅平菇PKB (Protein Kinase B) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
枯草芽孢桿菌UCHL1 (Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
莫哈韋芽孢桿菌LIFR (Leukemia Inhibitory Factor Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus mojavensis
釀酒酵母ANGPTL4 (Angiopoietin Like Protein 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
水叢毛單胞菌VMA (Vanillylmandelic Acid) ELISA Kit拉丁屬名: Comamonas aquatica
茯苓KIM-1 (Kidney Injury Molecule 1) ELISA Kit拉丁屬名: Wolfiporia extensa
白淺灰鏈霉菌C4BP (C4 Binding Protein) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
殼菌MUC4 (Mucin 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
乳酸乳球菌乳亞種TIMP-2 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Lactococcus lactis subsp.lactis
小蛇菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商小鼠抗心磷脂IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse anti-cardiolipin antibody IgM,ACA-IgM ELISA Kit特價促銷
小鼠抗血小板IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse platelet antibodies IgG/M/A,PA-IgG/M/A ELISA Kit特價促銷
OAT4L又稱URAT1 (Urate Transporter 1) 尿酸鹽重吸收轉(zhuǎn)運子1 (抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CD328/Siglec-7 唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素7Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ORAV1 高表達的蛋白1 規(guī)格 0.2ml
CIB2 Kit Human 人 CIB2 ELISA配對 ELISA
TRIP 英文名稱： 壞死因子受體相互作用蛋白 0.1ml
Cathepsin L 英文名稱： 組織蛋白酶L 0.1ml
Anti-DP-II 橋粒斑蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
mouse Caspase-6 小鼠Caspase-6Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-FLT-3/CD135 FMS樣酪氨酸激酶3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml
Beta-Nph(Human Beta-naphthol) ELISA Kit 人β酚 96T
phospho-Smad3 (Ser423) 英文名稱： 磷酸化細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3 0.1ml
ADAM17 英文名稱： 壞死因子α轉(zhuǎn)換酶 0.1ml
Anti-CD226/DNAM-1/FITC 熒光素標記CD226IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
sE-selectin ELISA Kit 大鼠可溶性E選擇素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Aggrecan/FITC 熒光素標記軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FBXO33 F-box蛋白相關(guān)蛋白33 規(guī)格 0.2ml
HBsAb(Mouse hepatitis B virus surface antibody) ELISA Kit 小鼠表面 96T
MLF1 Interacting Protein 英文名稱： 卡波西氏病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1 0.1ml
CLIP2 英文名稱： 細胞質(zhì)連接蛋白2 0.2ml
Anti-phospho-IRS1(Ser1101) 磷酸化受體底物-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Gzms-B(Human granzymes B) ELISA Kit 人顆粒酶BMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-NSBP1 核小體結(jié)合蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh IFN-Beta 干擾素β 規(guī)格 0.1ml
CCP(Human anti-cyclic citrullinated peptide) ELISA Kit 人抗環(huán)胍酸肽 96T
pan methyl Lysine 英文名稱： 泛甲基賴酸 0.2ml
