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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4078
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-19
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4078 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
粘質(zhì)沙雷菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | Serratia marcescens | LZR4078 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
地芽孢桿菌屬UGCG (UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit拉丁屬名: Geobacillus sp.
棉毛狀嗜熱霉EFNA4 (Ephrin A4) ELISA Kit 拉丁屬名: Thermomyces lanuginosus
栗色針孔菌fFDFT1 (Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
毛柄金錢(qián)菌(金針菇)ERβ (Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit用途: 食用、藥用
不動(dòng)桿菌SIAE (Sialic Acid Acetylesterase) ELISA Kit拉丁屬名: Acinetobacter radioresistens
枯草芽孢桿菌CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
白磷蘑菇MTF (Microtransferrin) ELISA Kit拉丁屬名: Agaricus bernardii Quél.
枯草芽孢桿菌CLDN14 (Claudin 14) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
釀酒酵母BAFF/CD257/TNFSF13B (B-Cell Activating Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Microbacterium flavumSCT (Secretin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
哈茨木霉PEX2 (Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
產(chǎn)紫青霉TNNI1 (Troponin I Type 1, Slow Skeletal) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium purpurogenum
腸膜明串珠菌IL-3 (Interleukin 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Leuconostoc mesenteroides
歧異假絲酵母PYGL (Glycogen Phosphorylase, Liver) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida diversa
焦土鏈霉菌PLA2G10 (Phospholipase A2, Group X) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces showdoensis
粘質(zhì)沙雷菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Mouse Progesterone,PROG ELISA Kit進(jìn)口/原裝
小鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)
小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Mouse apoprotein,apo-A1 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Mouse apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)
小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Mouse Apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit進(jìn)口/原裝
IL-8 白介素8(白細(xì)胞介素-8)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CD22/BLCAM B淋巴細(xì)胞粘附分子CD22Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Cathepsin Z 英文名稱(chēng)： 組織蛋白酶z 0.1ml
Anti-IFI16/p16 γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
NTX(Human cross linked N-telopeptide of type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型膠原N末端肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-HSP90 Alpha 熱休克蛋白90αMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MARCH8 膜相關(guān)環(huán)指蛋白8 規(guī)格 0.2ml
KLK 1(Human Kallikrein 1) ELISA Kit 人激肽釋放酶1 96T
Phospho-Ret (Tyr905) 英文名稱(chēng)： 磷酸化指狀蛋白R(shí)ET 0.1ml
ADM R 英文名稱(chēng)： 腎上腺髓質(zhì)素受體 0.1ml
Anti-CD26/ADCP2/DPP IV /FITC 熒光素標(biāo)記CD26IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
PF3(Mouse platelet factor 3) ELISA Kit 小鼠血小板因子3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-FLASH/CASP8AP2/FITC 熒光素標(biāo)記半胱氨酸蛋白酶8相關(guān)蛋白2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ELMO1 吞噬細(xì)胞運(yùn)動(dòng)蛋白1 規(guī)格 0.2ml
OSM (Rabbit Oncostatin-M) ELISA Kit 兔抑瘤素M 96T
MMP-26 英文名稱(chēng)： 基質(zhì)金屬蛋白酶-26 0.2ml
CLK3 英文名稱(chēng)： 細(xì)胞分裂周期樣激酶3 0.2ml
Anti-oxytocin receptor 催產(chǎn)素受體(縮宮素受體)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Casp-3(Human Caspase 3) ELISA Kit 人胱天蛋白酶3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-NRF-1 核呼吸因子-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh IGC 非洲爪蟾IGC 規(guī)格 1ml
VK1 ELISA Kit 大鼠維生素K1 96T
PARL 英文名稱(chēng)： 骨骼肌細(xì)胞線粒體膜蛋白PARL 0.2ml
