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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4080
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-19
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4080 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | Sheep-associated Malignant Catarrhal Fever Virus ( SA-MCFV，2) | LZR4080 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
旋絲毛殼LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium bostrychodes
綿毛嗜熱絲孢菌TP5 (Thymopentin) ELISA Kit拉丁屬名: Thermomyces lanuginosus
谷氨酸棒桿菌sCD14 (Soluble Cluster of Differentiation14) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
鹽長(zhǎng)命菌屬北方菌INS (Insulin) ELISA Kit拉丁屬名: Natrobaculum xinjiangense
馬賽菌T4 (Thyroxine) ELISA Kit拉丁屬名: Massilia eurypsychrophila
大腸埃希菌EPO (Erythropoietin) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
木賊鐮刀菌MRC1 (Mannose Receptor C Type 1 ) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
臺(tái)灣假海源桿菌IGF2BP3 (Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudidiomarina taiwanensis
球孢白僵菌LAT (Linker For Activation of T-cell) ELISA Kit用途: 防治桃小食心蟲(chóng)
大腸埃希菌AKAP1 (A Kinase Anchor Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
類(lèi)檸檬形枝孢TSGF (Tumor Specific Growth Facter/Tumor Supplied Group of Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Cladosporium paralimoniforme
蒼白芽孢桿菌GKN2 (Gastrokine 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus pallidus
果生鏈核盤(pán)菌PDH E1 (Pyruvate Dehydrogenase E1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
硬毛栓孔菌Anti-AlaRS (Anti-Alanyl-tRNA Synthetase/Anti-PL12-Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes trogii
葡萄球菌屬DHEA-S (Dehydroepiandrosterone Sulfate) ELISA Kit 拉丁屬名: Staphylococcus sp.
羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商Phospho-Caveolin-1 (Tyr14) 英文名稱(chēng)： 磷酸化細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-1 0.1ml
Anti-A Raf/ARAF A-RafMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
DA 人多巴胺Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Cyclin C 周期素CMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh NF-κB p105/p50(Phospho-Ser373) 磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子 規(guī)格 0.1ml
Human Linker for activation of T cell,LAT ELISA Kit 人T細(xì)胞活化連接蛋白 96T
TNF alpha 英文名稱(chēng)： 壞死因子-α/TNFα 0.1ml
Caveolin-1 英文名稱(chēng)： 細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-1 0.1ml
Anti-NFATc1 活化T細(xì)胞核因子1蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Nfkbie(Human nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor epsilon) KLISA Kit 人B細(xì)胞κ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子εMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-PAK3(Ser139) 磷酸化p21激活激酶3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HP1 alpha 異染色質(zhì)蛋白1-α(HP1α) 規(guī)格 0.1ml
INS(Mouse Insulin)ELISA Kit 小鼠胰島素 96T
Phospho-PKC alpha/beta II (Thr638/641) 英文名稱(chēng)： 磷酸化蛋白激酶C α/β2 0.1ml
APOD 英文名稱(chēng)： 載脂蛋白D 0.2ml
Anti-ACE2/FITC 熒光素標(biāo)記緊張素轉(zhuǎn)換酶2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
CXCR3(Mouse CXC-chemokine receptor 3) ELISA KIT 小鼠CXC趨化因子受體3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD25/IL-2RA/FITC 熒光素標(biāo)記CD25/白介素2-受體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Dystrophin/DMD 肌蛋白 規(guī)格 0.1ml
MT/MLT (Rat Melatonin,MT/MLT) ELISA Kit 大鼠褪黑素 96T
MMP-23 英文名稱(chēng)： 基質(zhì)金屬蛋白酶23 0.2ml
CLLD7 英文名稱(chēng)： 鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子CLLD7 0.2ml
Anti-phospho-P53 (Ser33) 磷酸化抑制基因P53Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
CK(Human Creatine Kinase) ELISA Kit 人肌酸激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Nm23 轉(zhuǎn)移抑制基因Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-11 白介素11 規(guī)格 0.1ml
HA(Mouse Hyaluronic acid) ELISA Kit 小鼠透明質(zhì)酸 96T
PARD6G 英文名稱(chēng)： PARD6G蛋白 0.1ml
