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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
志賀氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR4083
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-19
  • 更新日期: 2025-01-17
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR4083
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

志賀氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Shigella spp.

LZR4083

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

中度嗜熱雙突柄菌CEP110 (Centrosomal Protein 110kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Amphiplicatus metriothermophilus

刺葡萄孢霉屬GDF2 (Growth Differentiation Factor 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

管毛殼NCAD (Neural Cadherin) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium cuniculorum

非洲黑蛋巢DLK-1 (Delta Like 1 Homolog) ELISA Kit拉丁屬名: Cyathus africanus

紫荊生葉點霉菌SCF (Stem Cell Factor) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

香菇TR (Thrombin Receptor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

子午線假單胞菌CALU (Calumenin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas meridiana

 口腔支原體DPP4 (Dipeptidyl Peptidase IV) ELISA Kit拉丁屬名: orale

長野解支鏈淀粉芽孢桿菌SOD1 (Superoxide Dismutase 1, Soluble) ELISA Kit拉丁屬名: Pullulanibacillus naganoensis

扶桑本森頓酵母α1BG (Alpha-1-B-Glycoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Bensingtonia yamatoana

釀酒酵母UPP2 (Uridine Phosphorylase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

鏈霉菌FETUA (Fetuin A) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces  sp.

溫特曲霉原變種PLA1 (Phospholipase A1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus wentii var. wentii

鍺栓孔菌TAP (Transporter Associated with Antigen Processing) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes ochracea

香菇NFYC (Nuclear Transcription Factor Y Gamma) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
志賀氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Rhesus antibody Rh phospho-ATXN1(Thr236) 磷酸化失調(diào)癥蛋白1 規(guī)格 0.1ml

山羊抗兔 IgG(H+L)/Biotin 0.1ml 美國Jackson公司分裝

VEGF-A 英文名稱: 內(nèi)皮生長因子A 0.1ml

DNA polymerase delta 英文名稱: DNA聚合酶γ 0.2ml

Anti-APOD 載脂蛋白DMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

ERK4 英文名稱: 細胞外信號調(diào)節(jié)激酶4 0.1ml

Smad 2/3 Anti-Smad2/3 0.1ml

CBLN1 英文名稱: 小腦肽1 0.2ml

Anti-GADD45 生長抑制DNA損傷基因45Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Anti-Brucella/Biotin 生物素標記抗布魯氏菌IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-GRM4/mGluR4/FITC 熒光素標記促代謝型谷氨酸受體4IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh ChRM3/Acetylcholine receptor(M3) 毒蕈堿型乙酰膽堿受體M3 規(guī)格 0.1ml

Angiotensin II receptor(Ang II ) 緊張素Ⅱ受體(抗原) 0.5mg

rat IgA 英文名稱: 大鼠血清型IgA 0.2ml

人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA試劑盒 英文名稱:Human ReceptorⅠfor the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅠ ELISA Kit 特價供應(yīng)

人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅡ ELISA Kit特價促銷

人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Receptor Ⅲ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅢ ELISA Kit進口/原裝

人免疫球蛋白G Fc片段(Fcγ)ELISA試劑盒英文名稱:Human Fc region of immunoglobulin G,Fcγ ELISA Kit 進口/分裝

人免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒英文名稱:Human Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit 進口/原裝

PSAP/PAP peptide 酸性磷酸酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-Bad 相關(guān)死亡促進因子BadMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

CLN5 英文名稱: 神經(jīng)細胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN5 0.2ml

Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) 磷酸化P63抑制基因Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Human Leishimaria antibody ELISA Kit 人利什曼原蟲Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-KLF13/RFLAT-1 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子13Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh LAPTM4A 溶酶體相關(guān)膜蛋白4α 規(guī)格 0.2ml

P-CK(Pig pan-cytokeratin) ELISA Kit 豬廣譜細胞角蛋白 96T

PRR7 英文名稱: 突觸富含脯酸膜蛋白7 0.2ml

 


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