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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4085
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-19
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4085 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
猴病毒40探針法熒光定量PCR試劑盒 | Simian Virus 40(SV40)40 | LZR4085 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
米根霉CD4 (Cluster of Differentiation 4) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus oryzae
小單孢菌FHA (Filamentous Hemagglutinin) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。
球毛殼PGR (Progesterone Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Chaetomium globosum
釀酒酵母CCL4L1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 4 Like Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
豬鏈球菌Methylase ELISA Kit拉丁屬名: suis
楊樹細(xì)盾霉(都不提供)SFRP2 (Secreted Frizzled Related Protein 2) ELISA Kit用途: 植物病原物，用于該菌種群遺傳學(xué)研究
Clostridium sp.GNLY (Granulysin) ELISA Kit拉丁屬名: Clostridium sp.
雅致小克銀漢霉PLSCR1 (Phospholipid Scramblase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Cunninghamella elegans
污白干酪菌Grb7 (Growth Factor Receptor Bound Protein 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Tyromyces amygdalinus
毛霉?fàn)罹砻?/span>IL-10 (Interleukin-10) ELISA Kit
拉丁屬名: Circinella mucoroides
大腸埃希氏菌PCI (Procollagen I) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
松杉靈芝VEGF-B (Vascular Endothelial Cell Growth Factor B) ELISA Kit 拉丁屬名: Ganoderma tsugae
Penicillium RPL26 (Ribosomal Protein L26) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
異常漢遜酵母異常變種PCDHγA2 (Protocadherin Gamma A2) ELISA Kit 拉丁屬名: Hansenula anomala var. anomala
鏈霉菌屬FOXO1 (Forkhead Box Protein O1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces hyderabadensis
猴病毒40探針法熒光定量PCR試劑盒 Complement C4 / C4a 英文名稱： 過敏毒素C4/補(bǔ)體C4 0.1ml
Anti-Phospho-CD18 (Ser756/Thr758/759) 磷酸化整合素β2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
HSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta) 熱休克蛋白-90β (抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CD229/SLAMF3 CD229Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PANK4 泛酸激酶4 規(guī)格 0.2ml
ERBB3 Kit Human 人 HER3 / ErbB3 ELISA配對(duì) ELISA
TNFSF18 英文名稱： 壞死因子配體超家族成員18 0.1ml
CBLN3 英文名稱： 小腦肽3 0.2ml
Anti-LEF-1 淋巴增強(qiáng)因子-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
GOD(Human glucose oxidase) ELISA Kit 人葡萄糖氧化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-NF-H 高分子量神經(jīng)絲蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-1R2 /CD121b/IL1 Receptor II 白介素1受體2 規(guī)格 0.2ml
ALG(Human anti-lymphocyte globulin) ELISA Kit 人抗淋巴細(xì)胞球蛋白 96T
Phospho-PLC gamma 2(Tyr753) 英文名稱： 磷酸化磷酯酶Cγ2 0.1ml
人毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISA試劑盒 英文名稱：Human toxic shock syndrome toxin,TSST-1 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒 英文名稱：Human muscarinic acetylcholine receptor,M-AChR ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人毒蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3(M-AChR M3)ELISA試劑盒英文名稱：Human muscarinic acetylcholine receptor M3,M-AChR M3 ELISA Kit 特價(jià)促銷
Notch1/MOTC(Neurogenic locus notch homolog protein 1) 跨膜受體蛋白Notch-1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-AQP3 水通道蛋白-3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATG4D(Ser467) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D 規(guī)格 0.1ml
山羊抗人 IgG(H+L)/HRP 0.1ml 美國Jackson公司分裝
CLNS1A 英文名稱： 氯離子通道調(diào)節(jié)蛋白1A 0.2ml
Anti-Integrin beta 7 整合素β7Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
SLC/CCL21(Human secondary lymphoid-tissue chemokine) ELISA Kit 人二級(jí)淋巴組織趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-GTP cyclohydrolase 1/GTP-CH-1 三磷酸鳥苷環(huán)水解酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MMP19 基質(zhì)金屬蛋白酶18/19 規(guī)格 0.2ml
MMP-5(Human matrix metalloproteinase 5) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶5 96T
Reelin 英文名稱： 絡(luò)絲蛋白 0.1ml
