- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4089
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-19
- 更新日期: 2025-01-17
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4089 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
申克孢子細(xì)菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Sporothrix schenckii | LZR4089 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
嗜中溫寒冷桿菌STAT3 (Signal Transducer and Activator of Transcription 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Frigoribacterium mesophilum
解脂亞羅酵母OXA (Orexin A) ELISA Kit拉丁屬名: Yarrowia lipolytica
Mucor ardhlaengiktusNUP133 (Nucleoporin 133kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor ardhlaengiktus
寬被多年臥孔菌ALP (Alkaline Phosphatase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
白鬼筆PRL (Prolactin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母ANXA2 (Annexin A2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
葡萄牙棒孢酵母TL1A (Tumor Necrosis Factor Related Ligand 1A) ELISA Kit拉丁屬名: Clavispora lusitaniae
需鈉弧菌CS (Chondroitin Sulfate) ELISA Kit拉丁屬名: Vibrio natriegens
斑玉蕈GLRX3 (Glutaredoxin 3) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
根瘤菌TIEG1 (TGF Beta Inducible Early Response Gene 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
假單胞菌屬AMPK (Phosphorylated Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas reinekei
巨大芽胞桿菌OCLN (Occludin) ELISA Kit 用途: 分類、研究,具有處理富營(yíng)養(yǎng)水體和養(yǎng)殖廢水潛力。
嗜松青霉ATF-4 (Activating Transcription Factor 4) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母DMD (Dystrophin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
黑曲霉SIGLEC2 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger van Tieghem
申克孢子細(xì)菌探針法熒光定量PCR試劑盒 大鼠抗原(BTA)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Bladder tumor antigen,BTA ELISA Kit進(jìn)口/原裝
大鼠皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Cortisol ELISA Kit特價(jià)促銷
大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒英文名稱:rat Corticosterone,CORT ELISA Kit特價(jià)促銷
GLP-1R peptide 胰素樣肽-1受體多肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
KLK3 KLK3 / Kallikrein 3 兔單抗 (FITC) Human
Rhesus antibody Rh Phospho-Cyclin B1(Ser147) 磷酸化周期素B1 規(guī)格 0.1ml
顯影定影試劑A、B 各500ml 自產(chǎn)
Cbx8 英文名稱: 染色質(zhì)結(jié)合蛋白Cbx8 0.2ml
Anti-EEF2k 真核延伸因子激酶2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IL-22 大鼠白介素-22Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-DAPK1 凋亡相關(guān)蛋白激酶1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NDUFS3 線粒體復(fù)合物NDUFS3蛋白 規(guī)格 0.2ml
Human Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit 人組織型纖溶酶原激活劑 96T
SFRS7 英文名稱: 絲酸/蘇酸蛋白激酶SRPK7 0.2ml
Human triple-helical peptide,THP ELISA Kit 人螺旋肽 96T
TUBB3 (Neuronal Marker) 英文名稱: 神經(jīng)細(xì)胞特異性微管蛋白 0.2ml
CENPM 英文名稱: 著絲粒蛋白M 0.1ml
Anti-Calcitonin 降鈣素Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
phospho-Ep300 (Ser89) 英文名稱: 磷酸化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300 0.1ml
寡腺苷酸合成酶-1 Anti-OAS1 0.2ml
Anti-Smad2/3 /FITC 熒光素標(biāo)記Smad 2/3IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CLPTM1 英文名稱: 唇裂和腭裂相關(guān)跨膜蛋白1 0.2ml
Anti-VIP receptor II 腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體-II/活性腸肽受體-IIMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
MN(Human metanephrine) ELISA Kit 人變腎上腺素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-LCAT 卵磷膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Ku-70 DNA修復(fù)酶Ku70 規(guī)格 0.1ml
IGF-2 ELISA Kit 大鼠樣生長(zhǎng)因子2 96T
Pin1 英文名稱: 肽基脯酞順反異構(gòu)酶Pinl 0.1ml