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- 品牌：聯(lián)祖
- 產地：進口、國產
- 貨號：LZR4127
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-17
| 產地 | 進口、國產 |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4127 |
| 用途 | 公司產品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
乳房鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Streptococcus uberis | LZR4127 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品：
芽孢桿菌屬Sheep IL-35 (Interleukin 35) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus
大腸埃希氏桿菌Sheep UBE2C (Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
Sheep GC (Glucagon) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
平菇Sheep AMBP (Alpha-1-Microglobulin/Bikunin Precursor) ELISA Kit用途: 食用、藥用
綠膿桿菌Sheep GCK (Glucokinase) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa
假單胞菌屬Sheep COL15 (Collagen Type XV) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas sp
猴頭菇Sheep PTGS2/COX-2 (Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Hericium erinaceus
班戈錯湖嗜鹽堿紅菌Sheep FcεR I (Receptor I for the Fc Fragment of IgE) ELISA Kit拉丁屬名: Natronorubrum bangense
新疆鹽地桿菌Sheep PCDHβ16 (Protocadherin Beta 16) ELISA Kit 拉丁屬名: Salinibacterium xinjiangense
楊奇青霉Sheep TXLNb (Taxilin Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium janczwskii
長雙歧桿菌*亞種Sheep bTC (Betacellulin) ELISA Kit 拉丁屬名: Bifidobacterium infantis reuter
鏈格孢Sheep SOD2 (Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
金黃色葡萄球菌RN4220Sheep BRAK/CXCL14 (Breast and Kidney Expressed Chemokine) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus aureus subsp
芽孢桿菌屬Sheep PLAP/ALPP (Placental Alkaline Phosphatase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.
鹽生鹽古桿菌Sheep I-TAC (Interferon Inducible T-cell Alpha Chemoattractant) ELISA Kit拉丁屬名: Halobacterium halobium
乳房鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Rhesus antibody Rh phospho-Dnmt1(Ser732) 磷酸化DNA甲基轉移酶1 規(guī)格 0.1ml
ECL化學發(fā)光顯色液(A和B各50ml) 套
ZAR1 英文名稱： 受精卵抑制蛋白1 0.2ml
phospho-Dishevelled 2 (Ser143) 英文名稱： 磷酸化蓬亂蛋白2 0.1ml
CA10 Carbonic Anhydrase X / CA10 鼠單抗 (PE) Human
DUSP4 英文名稱： 原活化蛋白激酶磷酸酶-2 0.1ml
自噬相關蛋白7 Anti-ATG7 0.1ml
CCDC37 英文名稱： 卷曲螺旋結構域蛋白37 0.2ml
Anti-FoxP3 叉頭蛋白P3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Anti-GM-CSFR Alpha/FITC 熒光素標記粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體αIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-P14ARF/FITC 熒光素標記基因p14IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh BEX4 腦表達X連鎖蛋白4 規(guī)格 0.2ml
ADRA2 peptide 能受體2抗原 0.5mg
SCHAD 英文名稱： 短鏈L-3羥烷基輔酶A脫氫酶 0.2ml
Dlx1 英文名稱： 同源轉錄因子DLX1 0.2ml
Anti-Apaf-1(NT) 凋亡蛋白活性因子-1(N端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Exportin 5 英文名稱： 核輸出蛋白5 0.2ml
巨噬細胞炎性蛋白3α Anti-CCL20/MIP3αMacrophage inflammatory ptotein 3 alpha 0.1ml
Anti-VAMP-1/FITC 熒光素標記囊泡相關膜蛋白1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HER4 (Tyr984) 磷酸化HER4 規(guī)格 0.1ml
CD14(cluster of differentiation antigen 14) CD14/內毒素受體抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Collagen alpha-1(II) chain 英文名稱： Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素 0.1ml
Anti-GPNMB/Osteoactivin GPNMBMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
GM-CSF(Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-GRO Alpha/GRO-1 生長調節(jié)致癌基因-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MMS19 DNA修復甲基磺酸敏感性基因19 規(guī)格 0.2ml
Flt3(Human FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 人FMS樣酪酸激酶3 96T
RING2 英文名稱： 環(huán)指蛋白2 0.2ml
