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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4139
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4139 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Swine Papillomavirus | LZR4139 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
纖細(xì)屈曲海生菌Sheep PDGFA (Platelet Derived Growth Factor Subunit A ) ELISA Kit 拉丁屬名: Ancylomarina subtile
毛束霉Sheep COL10 (Collagen Type X) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichurus spiralis
屎腸球菌Sheep LTA (Lymphotoxin α)ELISA Kit拉丁屬名: Enterococcus faecium
金針菇Sheep CKMT1B (Creatine Kinase, Mitochondrial 1B ) ELISA Kit 拉丁屬名: Collybia velutipes(Curt.:Fr.)Quel.
干酪乳桿菌Sheep MYD88 (Myeloid Differentiation Factor 88) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus casei
枯斑擬盤多毛孢Sheep PKBG (Protein Kinase B Gamma) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
Lactococcus sp.Sheep AIF (Apoptosis Inducing Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Lactococcus sp.
匍匐曲霉Sheep CYTH1 (Cytohesin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus repens
草酸青霉Sheep BTA (Bladder Tumor Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium oxalicum
PseudarthrobacterSheep C3a (Complement Component 3a) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudarthrobacter siccitolerans
糞纖維單胞菌Sheep AQP-3 (Aquaporin 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Cellulomonas fimi
污黑腐皮殼Sheep OSCAR (Osteoclast Associated Receptor) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
平菇新宇711Sheep COL4 (Collagen Type IV) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
少根根霉Sheep tPA (Plasminogen Activator, Tissue) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus arrhizus
米曲霉Sheep PDIA6 (Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae
豬病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書IFN-r 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Ubiquitously expressed transcript 英文名稱： 廣泛表達(dá)轉(zhuǎn)錄蛋白UXT 0.2ml
DPEP3 英文名稱： 膜二肽酶3 0.2ml
Anti-Arfaptin 1 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ERAB 英文名稱： 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白 0.1ml
組織蛋白酶E Anti-cath-E/CE 0.1ml
Anti-Urocortin 3/FITC 熒光素標(biāo)記尿皮質(zhì)素UCN3IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
CCDC54 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白54 0.2ml
Anti-P16 基因p16Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Agtr I a(Human angiotensin II receptor type I a) ELISA Kit 人緊張素Ⅱ受體Ⅰa型Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-p53BP1/53BP1 p53結(jié)合蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HSP70/HSPA1A 熱休克蛋白-70 規(guī)格 0.1ml
hnRNP/RA33(Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/anti-RA33-antibody) ELISA Kit 人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33 96T
PRAS40 英文名稱： 蛋白激酶AKT底物1 0.2ml
人粒細(xì)胞特異性抗核(GS-ANA)ELISA試劑盒 英文名稱：Human granulocyte specific antinuclear antibody，GS-ANA ELISA Kit特價供應(yīng)
人內(nèi)阿米巴抗原ELISA試劑盒英文名稱：Human Entamoeba histolytica Antigen ELISA Kit特價促銷
人鏈激酶(SK)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Streptokinase,SK ELISA Kit特價供應(yīng)
S100B S100B蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml
Anti-Bcl-10/CLAP Bcl-10Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PHGDH 磷酸甘油酸脫氫酶 規(guī)格 0.2ml
IGF-1R 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
COMMD8 英文名稱： 銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白8 0.2ml
Anti-PFK2/PFKFB3 6磷酸果糖激酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
EBv IgM(Human epstein-barr virus IgM) ELISA Kit 人EB病毒IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-KLF6 轉(zhuǎn)染基因KLF6Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh large S protein 人乙毒pre S1/S2蛋白 規(guī)格 0.1ml
Glycoprotein VI(Human ) ELISA Kit 人糖蛋白VI 96T
PSGR 英文名稱： 特異性G蛋白偶聯(lián)受體/嗅覺受體51E2 0.1ml
