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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4149
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4149 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
馬生殖泰勒氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Taylorella equigenitalis | LZR4149 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
粟酒裂殖酵母Sheep MAP2K1 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Schizosaccharomyces pombe
光硬皮馬勃Sheep TAP (Transporter Associated with Antigen Processing) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
路普康湖冷桿菌Sheep CASP7 (Caspase 7) ELISA Kit拉丁屬名: Cryobacterium roopkundense
指狀青霉Sheep AQP-4 (Aquaporin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium digitatum
Paraconiothyrium hawaiiense Sheep GALR1 (Galanin Receptor 1) ELISA Kit 用途: 植物內(nèi)生真菌
串珠鐮孢Sheep ApoA1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium moniliforme
白地霉Sheep E2 (Estradiol) ELISA Kit拉丁屬名: Geotrichum candidum
耐久腸球菌Sheep CAPA (Cytotoxin Associated Protein A) ELISA Kit拉丁屬名: Enterococcus durans
科恩根霉Sheep PRKAα1 (Protein Kinase, AMP Activated Alpha 1) ELISA Kit 用途: 制葡萄糖用菌，產(chǎn)生葡萄糖苷酶
固氮菌Sheep ProGRP (Pro-Gastrin Releasing Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Azotobacter sp.
枯草芽孢桿菌Sheep PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
釀酒酵母Sheep CYSLTR2 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA Kit 用途: 發(fā)酵啤酒易清
人參土成對(duì)桿菌Sheep RB1 (Retinoblastoma Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Dyadobacter sp.
節(jié)桿菌Sheep CTSL (Cathepsin L) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter sp.
枯草芽孢桿菌Sheep ERβ (Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
馬生殖泰勒氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 ATP7B 英文名稱： 銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈 0.1ml
Anti- Alpha-ACTN4/FITC 熒光素標(biāo)記抗α-輔肌動(dòng)蛋白4IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
PPAR- Alpha(Mouse peroxisome proliferators activator receptors alpha) ELISA Kit 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體αMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Cav-1/FITC 熒光素標(biāo)記抗小凹蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EID1 乙酰基轉(zhuǎn)移酶EID1 規(guī)格 0.2ml
(CTX- I )ELISA Kit 大鼠Ⅰ型膠原C端肽 96T
MESP1 英文名稱： 心發(fā)育中胚層相關(guān)蛋白1 0.2ml
CCDC67 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白67 0.2ml
Anti-KLH 血藍(lán)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ADV-IgM(Human Adenovirus IgM) ELISA Kit 人腺病毒IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-KLK1 激肽釋放酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LANPL 富含亮氨酸樣酸性核蛋白 規(guī)格 0.2ml
NKA ELISA Kit(Ret) 大鼠神經(jīng)肽A 96T
P2RX5 英文名稱： 三磷酸腺苷受體P2X5 0.2ml
Human IPO-38 ELISA Kit 人IPO-38蛋白 96T
Transglutaminase 2 英文名稱： 谷酰胺轉(zhuǎn)胺酶2 0.2ml
CLEC2/CLEC1B 英文名稱： C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員B 0.2ml
Anti-CYP21 膽固醇21-羥化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
小鼠表面(HBsAb)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse hepatitis B virus surface antibody,HBsAb ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse hepatitis B virus surface antigen,HBsAg ELISA Kit特價(jià)促銷
小鼠核心(HBcAb)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse hepatitis B virus core antibody,HBcAb ELISA Kit進(jìn)口/原裝
Complement C3g fragment 英文名稱： 補(bǔ)體C3g片段 0.1ml
Anti-Hemagglutinin (H2N2) 病毒血凝素(H2N2)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
OX-B(Human Orexin B) ELISA Kit 人食欲素/阿立新BMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型病毒血凝素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MMAA/cblA 甲基尿癥cblA 規(guī)格 0.2ml
PI3K(Human Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit 人磷酸肌醇3激酶 96T
phospho-RGS19(Ser24) 英文名稱： 磷酸化G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19 0.1ml
