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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

紫芝Sheep TFPI2 (Tissue Factor Pathway Inhibitor 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

枯草芽孢桿菌Sheep DPYSL2 (Dihydropyrimidinase Like Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

鼠李糖乳桿菌Sheep FcγR3B (Fc Fragment of IgG Low Affinity IIIb Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus rhamnosus

美澳型核果褐腐病菌Sheep FcγR II/CD32 (Receptor II for the Fc Fragment of IgG) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

土壤柔武氏菌Sheep PAPPA2 (Pappalysin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Raoulla terrigena

干酪乳桿菌Sheep SDH (Sorbitol Dehydrogenase) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  casei

多主葡萄殼菌Sheep SIGLEC10 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 10) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

聚生殼菌Sheep CXCR1 (CXC-Chemokine Receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Botryosphaeria ribis Grossenb.

疏毛盤多毛孢Sheep VWF (Von Willebrand Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Pestalotia pauciseta

棕色固氮菌 Sheep BAFFR (B Cell Activating Factor Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Azotobacter vinelandii

光帽鱗傘Sheep HNRPU (Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein U) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

皮膚皮狀新絲孢酵母Sheep ALDH (Aldehyde Dehydrogenase, Mitochondrial) ELISA Kit拉丁屬名: Cutaneotrichosporon dermatis

鞘氨桿菌屬Sheep FCN1 (Ficolin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingobacterium sp.

擬枝孢鐮孢Sheep CLDN1 (Claudin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Fusarium sporotichioides

尖孢鐮刀菌Sheep PAP (Plasmin-Antiplasmin Complex) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
呂氏泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Rhesus antibody Rh phospho-Ephrin B(Ser300) 磷酸化Ephrin B 規格 0.1ml

DMBT1 (Deleted in malignant brain tumor 1) DMBT1基因抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg

大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒英文名稱：Rat thyroxine,T4 ELISA Kit特價促銷

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Rhesus antibody Rh Neurturin 神經生長因子 規格 0.1ml

Human phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit 人磷酸化細胞外信號調節激酶 96T

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Anti-Cyr61/IGFBP10/CCN1 富半胱氨酸肝素結合蛋白61Multi-class antibodies規格： 0.2ml

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Anti-PIWIL1 piwi樣1蛋白Multi-class antibodies規格： 0.1ml

PIIICP 大鼠III型前膠原肽(C端)Multi-class antibodies規格： 48T

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Rhesus antibody Rh NDRG1/Cap43 分化相關基因NDRG1 規格 0.1ml

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STK17A 英文名稱： 絲酸/蘇酸蛋白激酶17A/DAP凋亡誘導蛋白激酶1 0.2ml