- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4208
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-01-17
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4208 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
布氏布氏錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Trypanosoma brucei brucei | LZR4208 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
河北木霉IL-2 (Interleukin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichoderma hebeiense
四繞曲霉IL-4 (Interleukin 4) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus quadricinctus
釀酒酵母IL-6 (Interleukin 6) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
植物乳桿菌IL-24 (Interleukin 24) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
損蘑菇紫色桿菌IL-10 (Interleukin 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Janthinobacterium agaricidamnosum
斜臥青霉IL-17 (Interleukin 17) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium decumbens
靈芝(紅芝, 赤芝)IFN-γ (Interferon Gamma) ELISA Kit拉丁屬名: Ganoderma lucidum
水原市土地桿菌TNF-α (Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Pedobacter suwonensis
乳桿菌屬VEGF (Vascular Endothelial cell Growth Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus sp.
嗜中溫寒冷桿菌TGF-β1 (Transforming Growth Factor β1) ELISA Kit 拉丁屬名: Frigoribacterium sp.
耐輻射奇球菌CRP (C-Reactive Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Deinococcus radiodurans
小海綿羊肚菌INS (Insulin) ELISA Kit拉丁屬名: Morchella spongiola
漢遜德巴利酵母LH (Luteinizing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Debaryomyces hansenii
大腸埃希氏菌GH (Growth Hormone) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
短波單胞菌屬REN (Renin) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas staleyi
布氏布氏錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商Rhesus antibody Rh phospho-HNF4 (Ser313) 磷酸化肝細(xì)胞核因子4α 規(guī)格 0.1ml
CCR-1(CC chemokine receptor 1) 細(xì)胞表面趨化因子受體1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人凋亡相關(guān)半胱氨酸肽酶4(Casp4)ELISA試劑盒英文名稱:human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,Casp4 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒英文名稱:Human Factor-related Apoptosis,FAS ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒英文名稱:Human Factor-related Apoptosis ligand,FASL ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒英文名稱:Human apoptosis signal regulating kinase 1,ASK-1 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒英文名稱:Human apoptosis inducing factor,AIF ELISA Kit進(jìn)口/原裝
CD13 英文名稱: CD13肽酶N 0.1ml
Anti-IL-17D/IL-27 白介素-17DMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
FSA(Human fetal sulfoslycoprotein antigen) ELISA Kit 人胚胎性硫糖蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-HHV8/ORF K2 類病毒8Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MG 雞毒支原體 規(guī)格 0.2ml
AC-1(Human adenylyl cyclase 1) ELISA Kit 人腺苷酸環(huán)化酶1 96T
REG1 beta 英文名稱: 胰島因子β 0.2ml
AT1R(Angiotensin II Type 1 Receptor) 緊張素Ⅱ-1型受體抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒英文名稱:Human Pulmonary surfatcant-associated protein C,SP-C ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Pulmonary surfatcant-associated protein D,SP-D ELISA Kit特價(jià)促銷
人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒 英文名稱:Human pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒英文名稱:Human Lung resistance-related protein,LRP ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人衣原體(Cpn-Ab)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Chlamydia pneumoniae antibody,Cpn-Ab ELISA Kit特價(jià)促銷
Integrin alpha 1 整合素α1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CRAT 英文名稱: 肉毒堿O-乙酰基轉(zhuǎn)移酶 0.2ml
Anti-phospho-Histone H1.4 (Thr18) 磷酸化乙酰化組蛋白H1bMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
M-CSF(Human Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA kit 人巨噬細(xì)胞集落刺激因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-glypican 3/GPC3 磷脂酰基醇蛋白聚糖-3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Bov IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的小鼠抗IgG 規(guī)格 0.5ml
Agtr I a(Human angiotensin II receptor type I a) ELISA Kit 人緊張素Ⅱ受體Ⅰa型 96T
RBPJK 英文名稱: Notch轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白R(shí)BPJK 0.2ml