- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4227
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-01-17
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4227 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
天花病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū) | Variola Virus(VARV) | LZR4227 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
冷溫木拉克酵母PI (Proinsulin) ELISA Kit拉丁屬名: Mrakia frigida
枯草芽孢桿菌SELP (P-Selectin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
弗雷德里克斯堡假單胞菌RANκL (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa B Ligand) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
草色鏈霉菌RANTES (Regulated On Activation, Normal T-Cell Expressed and Secreted) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces stramineus
灰葡萄孢(灰霉病菌)S100B (S100 Calcium Binding Protein B) ELISA Kit 用途: 教學(xué)科研
斑玉蕈SELE (E-Selectin) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
印度毛殼SDF-1 (Stromal Cell Derived Factor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium indicum
釀酒酵母TPO (Thrombopoietin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen
伯頓生絲畢赤酵母TSH (Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Hyphopichia burtonii
香菇T4 (Thyroxine) ELISA Kit拉丁屬名: Lentinula edodes
薄層菌TF (Tissue Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Hymenobacter perfusus
維氏紅色球菌TIMP-2 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodoglobus vestalii
溜曲霉TIMP-3 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 3) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
猴頭TIMP-4 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 4) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
卷枝毛霉詹森變型TNF-β (Tumor Necrosis Factor β) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor circinelloides f. janssenii
天花病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)雞17-酮類(lèi)固醇(17-KS)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Chicken 17-ketosteroids,17-KS ELISA Kit 特價(jià)促銷(xiāo)
IL-5 peptide 白細(xì)胞介素5抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-ADAMTS7(NT) 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7 (N端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDC27/ANAPC3(Thr244) 磷酸化后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3 規(guī)格 0.1ml
切片盒 50片
Wnt8b 英文名稱(chēng): WNT蛋白家族Wnt8b 0.2ml
phospho-DDX3(Thr322) 英文名稱(chēng): 磷酸化三磷酸腺苷依賴(lài)解旋酶DDX3 0.1ml
CD19 英文名稱(chēng): CD19 0.1ml
Anti-HSP20 熱休克蛋白-20Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
AT2R-Ab(Human Angiotensin II Receptor 2 antibody) ELISA Kit 人緊張素Ⅱ受體2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-IFNGR1/CD119 干擾素-gamma受體1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MAOA 單氨氧化酶A 規(guī)格 0.1ml
MASP(Human mannan binding lectin associated serine protease) ELISA Kit 人甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲酸蛋白酶 96T
RPE65 英文名稱(chēng): 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞特異性蛋白65 0.2ml
雞促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Chicken follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
雞催乳素(PRL)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Chicken prolactin,PRL ELISA Kit進(jìn)口/原裝
phospho-heterochromatin protein 1 (pTyr41)peptide 異染色質(zhì)蛋白1(磷酸化多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-ABCD1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Jun(Ser243) 磷酸化原癌基因c-Jun 規(guī)格 0.1ml
兔抗猴IgG血清 0.5ml 國(guó)產(chǎn)
WNT5A 英文名稱(chēng): 信號(hào)通路Wnt* 0.1ml
CRIPTO 英文名稱(chēng): 衍化生長(zhǎng)因子(N端) 0.2ml
Anti-IAA (Indole-3-Acetic Acid) 吲哚乙酸/植物生長(zhǎng)素Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CK-19(Human cytokeratin 19) ELISA Kit 人細(xì)胞角蛋白19Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho Histone H1,4(Ser27) 磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MEOX 2 間充質(zhì)同源盒蛋白2 規(guī)格 0.2ml
PK(Human pyruvate kinase) ELISA Kit 人酸激酶 96T
ROCK2 英文名稱(chēng): Rho相關(guān)蛋白激酶2 0.1ml