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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
沃爾巴克氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR4249
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-01-17
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR4249
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

沃爾巴克氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒

Wolbachia spp.

LZR4249

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

Mesorhizobium拉丁屬名: Mesorhizobium  sediminum sp. nov.

中間檸檬酸桿菌拉丁屬名: Citrobacter  intermedias

密叢毛霉拉丁屬名: Mucor plumbeus

巴氏葡萄球菌拉丁屬名: Staphylococcus pasteuri

米根霉拉丁屬名: Rhizopus oryzae

芋枝孢注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

耐久腸球菌拉丁屬名: Enterococcus  durans

靈芝注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

Bacillus atrophaeus注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

細極鏈格孢注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

Chrysonilia sitophila注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

海海芽孢桿菌拉丁屬名: Marinibacillus marinus

竹喙球菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
沃爾巴克氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒 人絨毛膜激素(HCG)ELISA試劑盒英文名稱:Human Chorionic Gonadotrophin,HCG ELISA Kit進口/分裝

phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) peptide 磷酸化原活化蛋白激酶p38抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Anti-MASH1 神經母細胞特異性轉移因子Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-AQP2(Ser269) 磷酸化水通道蛋白2 規格 0.1ml

Tgase 濃縮液 0.1ml 進口分裝

UEVLD 英文名稱: 泛素結合酶E2樣蛋白 0.2ml

DIRC2 英文名稱: 干擾蛋白2 0.2ml

CD2BP3 英文名稱: CD2結合蛋白3 0.2ml

Anti-lamin A 核纖層蛋白AMulti-class antibodies規格: 0.2ml

HAase(Human Hyaluronidase) ELISA Kit 人透明質酸酶Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-NF-M 中分子量神經絲蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh IL-17RB 白介素-17B受體 規格 0.1ml

IL-5 ELISA Kit 大鼠白介素5 96T

Profilin 1 英文名稱: 前纖維蛋白1 0.1ml

HA Kit Influenza 甲型 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配對 ELISA

TRPM3 英文名稱: 瞬時受體電位離子通道蛋白3(M亞家族) 0.2ml

CYP11B2 英文名稱: 醛固酮合成酶CYP11B2 0.2ml

Anti-cdc25A 細胞分裂周期蛋白25Multi-class antibodies規格: 0.2ml

小鼠催產素(OT)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse oxytocin,OT ELISA Kit進口/分裝

小鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒英文名稱:mouse prolactin,PRL ELISA Kit特價促銷

小鼠大內皮素(Big ET)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Big Endothelin,Big ET ELISA Kit進口/分裝

CSF3 英文名稱: 粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子3 0.1ml

anti-Cathepsin L 組織蛋白酶LMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Akt/PKC(Protein Kinase C,PKC) 蛋白激酶C(多肽抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Anti-Phospho-Beta-Catenin (Ser675) 磷酸化β 連環素蛋白Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh PCDHGA9 原鈣粘蛋白γA9 規格 0.2ml

RBP4 Kit Human 人 RBP4 / PRBP ELISA配對 ELISA

phospho-Tau protein(Ser519) 英文名稱: 磷酸化微管相關蛋白 0.1ml


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