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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4255
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4255 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
酵母菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Yeast | LZR4255 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
褐球固氮菌拉丁屬名: Azotobacter chroococcum
藍(lán)色犁頭霉拉丁屬名: Absidia caerulea
蘋果雙殼菌*注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
枯草芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
火木層孔菌拉丁屬名: Phellinus igniarius
暗色擬莖點霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
美澳型核果褐腐病菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
巨型艾美耳球蟲拉丁屬名: maxima
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
黃硬皮馬勃注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
土曲霉拉丁屬名: Aspergillus terreus
泥生刺囊殼拉丁屬名: Ascotricha sedimenticola
光帽鱗傘(滑菇)拉丁屬名: Pholiota nameko
黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
綠針假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas chlororaphis
酵母菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Rhesus antibody Rh PDCD6/ALG2 凋亡相關(guān)蛋白6 規(guī)格 0.2ml
MICB Kit Human 人 MICB / MIC-B ELISA配對 ELISA
Transportin 1 英文名稱： 轉(zhuǎn)運蛋白1 0.2ml
C4 binding protein 英文名稱： 補體4結(jié)合蛋白 0.2ml
Anti-CA I 碳酸酐酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA Kit 特價供應(yīng)
小鼠氧化(OLAb)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISA Kit特價促銷
CD33 英文名稱： CD33 0.2ml
Anti-IL-22 白介素-22Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MOG ELISA Kit (human) 抗髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(人)Multi-class antibodies規(guī)格： 96T
Anti-IL-21R 白介素21受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LRRTM1 富含亮氨酸重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白1 規(guī)格 0.2ml
BMP-6(Human Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit 人骨形成蛋白6 96T
phospho-ROCK2(Thr249) 英文名稱： 磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2 0.1ml
腦鈉素/利鈉肽 Anti-BNP 0.1ml
ERCC6L 英文名稱： 發(fā)育相關(guān)蛋白ERCC6L(乙醇致畸因子) 0.2ml
一種抑制基因 Anti-PTEN/MMAC1 0.1ml
Anti- Alpha-Synuclein/FITC 熒光素標(biāo)記核突觸蛋白-αIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Met(Tyr1234/1235) 磷酸化肝細(xì)胞生長因子受體(原癌基因) 規(guī)格 0.1ml
HIV gp120 病毒(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Caspase 3,Casp-3 ELISA Kit特價促銷
CSMD3 英文名稱： CSMD3蛋白 0.2ml
Anti-Follistatin 卵泡抑素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TGF Beta2(Human transforming growth factors Beta2) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)化生長因子β2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-FSP/Spastin 纖維母細(xì)胞表面蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格 0.1ml
IRAP(Human ICE protease-activating factor) ELISA Kit 人ICE蛋白酶激活因子 96T
SLITRK5 英文名稱： 神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK5 0.2ml
