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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4278
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4278 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
狗源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | 50T | LZR4278 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
蟲草拉丁屬名: Cordyceps sp.
惡臭假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas putida
粘質(zhì)沙雷氏菌拉丁屬名: Serratia marcescens
頂頭孢霉拉丁屬名: Cephalosporium acremonium
白絨紅蛋巢菌拉丁屬名: Nidula niveotomentosa
焦曲霉拉丁屬名: Aspergillus ustus (Bainier) Thom et Church
總狀共頭霉拉丁屬名: Syncephalastrum racemosum
耐輻射奇球菌拉丁屬名: Deinococcus radiodurans
散囊菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
煙曲霉拉丁屬名: Aspergillus fumigatus
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
光滑青霉拉丁屬名: Penicillium glabrum
茯苓注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas maltophilia (ex Hugh and Ryschenkow 1961) Hugh 1981
魯氏毛霉拉丁屬名: Mucor rouxianus (Calmette) Wehmer
狗源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格C8orf86 英文名稱： 8號染色體開放閱讀框86 0.2ml
Anti-phospho-c-Jun (Ser243) 磷酸化原癌基因c-JunMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Melamine/OVA(ovalbumin) 三聚氰胺與雞卵白蛋白偶聯(lián)物Multi-class antibodies規(guī)格： 10mg
Anti-CDK7 周期素依賴性激酶7Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh OGG1/8 hydroxyguanine DNA glycosylase 8-羥基鳥嘌呤DNA糖基化酶 規(guī)格 0.1ml
Protein G Sepharose 4 Fast Flow 重組蛋白G親和層析柱 2ml柱床體積
TIMP-1(CT) 英文名稱： 金屬蛋白酶組織抑制因子-1(C端) 0.1ml
CD44v4 英文名稱： CD44V4 0.1ml
Anti-E-cadherin 上皮鈣粘附分子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
DPYSL3(Human dihydropyrimidinase-like 3) ELISA Kit 人二氫嘧啶酶樣3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MTHFR 亞甲基四氫葉酸還原酶MTHFRMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Insulin 蛋白 規(guī)格 0.1ml
TIMP-3 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3 96T
Phospho-PAK2 (Ser20) 英文名稱： 磷酸化p21激活激酶2 0.1ml
ARFIP1 英文名稱： ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1 0.1ml
Anti-CD3/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記CD3IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
NAP-2/CXCL7 ELISA Kit 大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-ApoB/FITC 熒光素標(biāo)記載脂蛋白BIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM59A FAM59A蛋白 規(guī)格 0.2ml
FAS/CD95(Mouse Factor-related Apoptosis) ELISA Kit 小鼠凋亡相關(guān)因子 96T
MYL1+3 英文名稱： 肌球蛋白輕鏈1/3 0.2ml
CTCF 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄阻抑蛋白CTCF 0.2ml
Anti-Phospho-FADD (Ser191) 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
HPV-IgM(Human papillomavirus IgM) ELISA Kit 人狀瘤病毒IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MAGE-1 相關(guān)抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh KDEL (ER Marker) 賴氨酸，天冬氨酸，谷氨酸，亮氨酸相關(guān)序列 規(guī)格 0.2ml
Big ET ELISA Kit 大鼠大內(nèi)皮素 96T
PDZD6 英文名稱： PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK6蛋白 0.2ml
