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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4280
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4280 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
含麩質(zhì)谷物源性探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | 50T | LZR4280 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
孟氏假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
綠粘帚霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger van Tieghem
短波單胞菌拉丁屬名: Brevundimonas sp.
地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus licheniformis
土壤成對(duì)桿菌拉丁屬名: Dyadobacter soil
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
冷桿菌屬拉丁屬名: Cryobacterium luteum
葡萄座腔菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
玉米大斑拉丁屬名: Setosphaeria turcica
鮑魚(yú)側(cè)耳注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
農(nóng)藥殘留速測(cè)儀（農(nóng)卡專(zhuān)用）規(guī)格: 套 微型 6通道
香菇拉丁屬名: Lentinula edodes
腐皮鐮孢拉丁屬名: Fusarium solani
丁香暗黃鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces lilacinofulvus
含麩質(zhì)谷物源性探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商CT13 英文名稱(chēng)： /抗原13 0.2ml
Anti-CGP-39/YKL-40 軟骨糖蛋白39Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Caspase-6 人Caspase-6Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-DCN/Decorin 核心蛋白聚糖Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Nestin 巢蛋白/神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白 規(guī)格 0.1ml
Human Thymosin ELISA Kit 人胸腺肽 96T
TIE2 英文名稱(chēng)： 生成素受體2 0.1ml
CD44v7 英文名稱(chēng)： CD44V7 0.1ml
Anti-NCOA2/KAT13C 核受體輔助激活蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit 人降解加速因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Smac/DIABLO 線粒體促凋亡蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat anti-rat IgG whole serum 羊抗大鼠IgG抗血清 規(guī)格 1ml
MK(Human Midkine) ELISA Kit 人中期因子 96T
phospho-p95 NBS1 (Ser343) 英文名稱(chēng)： 磷酸化DNA修復(fù)蛋白NBS1 0.1ml
Human Insulin Receptor Beta,ISR- Beta ELISA KIT 人受體β 96T
TSLC1 英文名稱(chēng)： 細(xì)胞粘附分子1 0.1ml
COLEC12 英文名稱(chēng)： 凝集胎盤(pán)蛋白1 0.2ml
Anti-DRD4 多巴胺受體D4Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：guinea pig Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Guinea pig leukotriene D4,LT-D4 ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
豚鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Guinea pig Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
CTDSPL2 英文名稱(chēng)： CTDSPL2蛋白 0.2ml
Anti-CD86/B7-2 CD86Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
BIRC5/Survivin variant 細(xì)胞凋亡抑制因子4(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CD83/HB15 CD83Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh OVA/SerpinB8 雞卵白蛋白/卵清蛋白 規(guī)格 0.1ml
CST2 Kit Human 人 Cystatin SA / CST2 ELISA配對(duì) ELISA
Phospho-TSC2(Ser1418) 英文名稱(chēng)： 磷酸化性硬化蛋白 0.1ml
