|
- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4286
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4286 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
胡蘿卜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | 50T | LZR4286 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
球孢白僵菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
極細(xì)枝孢拉丁屬名: Cladosporium tenuissimum
大腸桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
膠凍樣芽胞桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大腸埃希菌拉丁屬名: coli
厚環(huán)粘蓋牛肝菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
燕麥鐮孢拉丁屬名: Fusarium avenaceum
裂孔平伏菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
大豆慢生根瘤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
蠟狀芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus cereus
小孢根霉寡孢變種拉丁屬名: Rhizopus microsporus var. oligosporus
猴頭菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
薄層菌屬拉丁屬名: Hymenobacter sp.
郎伍德鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces longwoodensis
胡蘿卜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Cardiac FABP 英文名稱： 脂肪酸結(jié)合蛋白3 0.1ml
Anti-Integrin beta 2/CD18/LFA-1 整合素β2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
XIAP(X-linked Inhibitor of Apoptosis Protein) X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-Alpha-Catenin α-連環(huán)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh PCDHGC3/PCDH2 原鈣粘蛋白γC3 規(guī)格 0.2ml
FLT4 Kit Human 人 VEGFR3 / FLT4 ELISA配對 ELISA
TNFSF13 英文名稱： 壞死因子配體超家族成員13 0.2ml
CD46 英文名稱： 膜輔蛋白 0.2ml
Anti-NFKB p52/NF-κB2 p100 細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ADH/VP/AVP(Human antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin) ELISA Kit 人抗激素/加壓素/精氨酸加壓素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Leptin 瘦素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh KMT1C/G9a 組蛋白H3賴氨酸9甲基化1C 規(guī)格 0.2ml
RLN(Human Relaxin) ELISA Kit 人松弛肽/松弛素 96T
Phospho-PLC gamma 1(Ser1248) 英文名稱： 磷酸化磷酯酶Cγ1 0.1ml
phospho-APC1 (Ser355) 英文名稱： 磷酸化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1 0.1ml
Anti-Annexin I/FITC 熒光素標(biāo)記人、大、小鼠膜粘連蛋白 IIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ALD ELISA Kit 大鼠醛固酮Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-ASCL1/MASH1 /FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)母細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移因子IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM123B/AMER1 腎母細(xì)胞瘤X蛋白 規(guī)格 0.2ml
MBP ELISA Kit 大鼠主要堿性蛋白 96T
MOG 英文名稱： 髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白 0.1ml
Ctip2 英文名稱： B淋巴細(xì)胞/11B 0.2ml
Anti-L-Citrulline L-瓜氨酸Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2mg
C3c(Human Complement fragment 3c) ELISA Kit 人補(bǔ)體片段3cMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-RRM1 核糖核苷酸還原酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HDAC6 組蛋白去乙酰化酶6 規(guī)格 0.1ml
Beta Manase(Mouse Beta mannosidase) ELISA Kit 小鼠β甘露糖苷酶 96T
PAX9 英文名稱： 配對盒基因9 0.1ml
