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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

德爾布有孢圓酵母拉丁屬名: Torulaspora delbrueckii

檸檬色節(jié)桿菌拉丁屬名: Arthrobacter citreus

絮邊蘑菇注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

運動節(jié)桿菌拉丁屬名: Arthrobacter agilis

稀褶乳菇拉丁屬名: Lactarius hygrophoroides

大腸埃希菌拉丁屬名: coli

布魯氏菌病全乳環(huán)狀反應抗原規(guī)格: 5ml

枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

澳大利亞平臍蠕孢拉丁屬名: Bipolaris australiensis

燕麥嗜酸菌西瓜亞種*注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

谷氨酸棒桿菌Ⅰ型拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

飼料類芽胞桿菌用途: 分解纖維素，用于秸稈降解、腐熟

松木青霉拉丁屬名: Penicillium pinetorum

南海芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus nanhaiensis
花生源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 Matrixyl Acetate 五勝肽/美容肽—M肽Multi-class antibodies規(guī)格： 1g

大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit 特價促銷

大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 特價供應

大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit 進口/分裝

大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit 進口/原裝

大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Leptin receptor,LR/Ob-R ELISA Kit進口/原裝

GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8) 生長分化因子8抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CD5 英文名稱： CD5 0.1ml

Anti-phospho-ERK1(Thr202/Tyr204) 磷酸化原活化蛋白激酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

FDA(Human Fructose-1,6-bisphosphate aldolase) ELISA Kit 人果糖1,6二磷酸醛縮酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Notch3 跨膜受體蛋白Notch-3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh IKAROS 鋅指蛋白IKAROS 規(guī)格 0.2ml

HIS ELISA Kit 大鼠組胺 96T

SHP1 英文名稱： 蛋白酪酸磷酸酶1C 0.1ml

phospho-c-Jun(Ser63) 英文名稱： 磷酸化原癌基因c-Jun 0.1ml

Anti-CAP2 環(huán)化酶相關蛋白CAP-2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CD34(Human) 人CD34Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CYP2E1 抗細胞色素P450ⅡE1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Neurotrimin/HNT 神經營養(yǎng)因子HNT 規(guī)格 0.2ml

Human Eukaryotic translation initiation factor 3a,eIF3a ELISA Kit 人真核翻譯起始因子3a 96T

Thymulin 英文名稱： 胸腺素 0.2ml

CTNNA1 英文名稱： α-連環(huán)蛋白(鈣粘蛋白相關蛋白)Catenin α 0.1ml

Anti-NeuN 神經元核抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

cPLA2(Human cytosolic phospholipase A2) ELISA Kit 人胞漿型磷脂酶A2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-p95/NBS1 (Ser343) 磷酸化DNA修復蛋白NBS1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh IL-6 白介素6 規(guī)格 0.1ml

mouse IgA ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgA 96T

phospho-P70 S6 Kinase beta (Thr228) 英文名稱： 磷酸化核糖體S6蛋白激酶 0.1ml