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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4291
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4291 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
火雞源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | 50T | LZR4291 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
日光鹽場喜鹽芽孢桿菌拉丁屬名: Halobacillus yeomjeoni
賴氏毛殼拉丁屬名: Chaetomium raii
黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
大腸桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
*酸熱脂環(huán)酸芽胞桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
分枝節(jié)桿菌拉丁屬名: Arthrobacter ramosus
米蘭鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces mediolani
粉紅單端孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
膠韌革菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
假諾卡氏屬拉丁屬名: Pseudonocardia aurantiaca
布魯氏菌 生物Ⅱ型拉丁屬名: abortus BiovarⅡ
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
韓國靈芝注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus licheniformis
芽胞桿菌用途: 在無機(jī)鹽培養(yǎng)基中以50mg/l的吡蟲啉為碳源培養(yǎng)，6天內(nèi)吡蟲啉降解率30%左右
火雞源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Rhesus antibody Rh Phospho-CRMP2 (Thr514) 磷酸化二氫嘧啶酶樣2 規(guī)格 0.1ml
考馬斯亮藍(lán)G-250溶液 100ml/500ml 自產(chǎn)
ZFP219 英文名稱： 鋅指蛋白219 0.2ml
DLC1 英文名稱： 胞漿動力蛋白輕鏈1 0.2ml
PRDX6 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 鼠單抗 (FITC) Human
E2F4 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子E2F-4 0.1ml
轉(zhuǎn)移生長因子–β2 Anti-TGF-β2 0.1ml
CD56 英文名稱： 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1 0.1ml
Anti-Phospho-MK1/2 (Ser221) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶1/2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Human coagulation factor VIII related antigen,F VIII -Ag ELISA Kit 人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-RNF148 環(huán)指蛋白148Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GSTO1 谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶ω1 規(guī)格 0.1ml
SP-A(Human Surfactant Protein A) ELISA Kit 人表面活性蛋白A 96T
SHANK3 英文名稱： 富含脯酸突觸相關(guān)蛋白SHANK3 0.2ml
ABAT 英文名稱： γ基丁酸轉(zhuǎn)酶 0.1ml
Anti-CD244/NKR2B4/SLAMF4/FITC 熒光素標(biāo)記CD244IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
BF(Mouse factor B) ELISA Kit 小鼠B因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD4/PE 熒光素PE標(biāo)記CD4IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EAAT3 膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸運(yùn)載蛋白3(神經(jīng)/上皮細(xì)胞谷氨酸運(yùn)載蛋白) 規(guī)格 0.1ml
Beta-HCG 人絨毛膜激素(夾心法一/二步法) 96T
MT-ND1 英文名稱： NADH復(fù)合體1 0.2ml
CTR9 英文名稱： 血小板活化因子CTR9 0.2ml
Anti-MASP 甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Pim1(Human proviral integration site 1) ELISA Kit 人前病毒整合位點(diǎn)1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-IRF3 干擾素調(diào)節(jié)因子3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LHX6 轉(zhuǎn)錄因子LHX6 規(guī)格 0.2ml
TUBB(Human Beta-tubulin) ELISA kit 人β-微管蛋白 96T
PCK1 英文名稱： 磷酸烯醇酸羧激酶 0.2ml
