- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4300
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-01-17
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4300 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
駱駝源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | 50T | LZR4300 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
蘇云金芽胞桿菌用途: 用于抗蟲(chóng)基因的分離和抗蟲(chóng)相關(guān)基礎(chǔ)研究。
膠胞用途: 教學(xué)科研
粉紅鐮孢拉丁屬名: Fusarium roseum
布雷絲枝霉拉丁屬名: Chaetocladium brefeldii
寄生曲霉拉丁屬名: Aspergillus parasiticus
榆干側(cè)耳、大榆磨拉丁屬名: Pleurotus ulmarius (Bull. : Fr.) Quél
藤倉(cāng)赤霉用途: 產(chǎn)赤霉素GA3
米根霉拉丁屬名: Rhizopus oryzae
加德那氏鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces gardneri
谷氨酸棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
圈卷產(chǎn)色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces ansochromogenes
新城疫病毒拉丁屬名: Newcastle disease virus
紅根須腹菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
膠孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
阪崎腸桿菌拉丁屬名: Enterobacter sakazakii
駱駝源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商CXCL5 英文名稱: 上皮中性粒細(xì)胞活化肽78 0.1ml
Anti-Phospho-DARPP32 (Thr75) 磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Survivin 細(xì)胞凋亡抑制因子的一種(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD82/KAI1 轉(zhuǎn)移抑制蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh OVCA1 相關(guān)基因1 規(guī)格 0.2ml
CFH Kit Human 人 Complement Factor H / CFH ELISA配對(duì) ELISA
TNFR1 英文名稱: 壞死因子受體1 0.1ml
CD66a 英文名稱: 癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子1 0.2ml
Anti-phospho-PAK1(Ser) 磷酸化p21激活激酶1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
VCL(Human vinculin) ELISA Kit 人紐蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 磷酸化p21激活激酶1/2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HPR 結(jié)合珠蛋白相關(guān)蛋白 規(guī)格 0.2ml
Ach ELISA Kit 大鼠乙酰膽堿 96T
Phospho-PKR (Thr446 + Thr451) 英文名稱: 磷酸化蛋白激酶R 0.1ml
TP53I13 英文名稱: 蛋白p53誘導(dǎo)蛋白13(抑制基因) 0.2ml
CRMP4 英文名稱: 腦衰蛋白反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白4 0.2ml
Anti-CD79A/IGBP-1 免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
規(guī)格:2*96孔抗原2板ELISA試劑盒英文名稱:Elisa進(jìn)口/分裝
豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
豬細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
Cullin 5 英文名稱: 加壓素激活鈣啟動(dòng)受體蛋白1 0.2ml
Anti-LAIR-2/CD306 白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
LCN2(Human lipocalin 2) ELISA Kit 人脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-MAPKAPK2 (Thr334) 磷酸化原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KCNA7 鉀電壓閥門(mén)通道混合器相關(guān)亞家族成員7 規(guī)格 0.1ml
PGE1 ELISA Kit 大鼠素E1 96T
phospho-PRL (Ser163) 英文名稱: 磷酸化泌乳素 0.1ml