|
- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4302
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4302 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
貓源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | 50T | LZR4302 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
Sinomonas拉丁屬名: Sinomonas susongensis sp. nov.
慢生根瘤菌拉丁屬名: Bradyrhizobium sp.
黃青霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
副球菌拉丁屬名: Paracoccus sp.
大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
香菇用途: 栽培
假單胞菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大毛霉拉丁屬名: Mucor mucedo (Linnaeus) Fresenius
網(wǎng)孢麻孢菌拉丁屬名: Gelasinospora reticulata
橙蓋傘注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
中國油脂酵母拉丁屬名: Lipomyces chinensis
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
淡紫擬青霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
葡萄座腔菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
卵孢白僵菌用途: 生物防治
貓源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格CHCHD8 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD8 0.2ml
Anti-CD71/TFR 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer) CD147(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CCL12/MCP5 單核細胞趨化蛋白5Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCDHA2 原鈣粘附蛋白α2 規(guī)格 0.2ml
CD3D Kit Human 人 CD3d / CD3 delta ELISA配對 ELISA
TM7SF2 英文名稱： 脫氫膽固醇還原酶14 0.2ml
CD68 英文名稱： CD68 0.1ml
Anti-NFKB p65 細胞核因子/k基因結(jié)合核因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
EMP(Human erythrocyte membrane protein) ELISA Kit 人紅細胞膜蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Parvalbumin 細小清蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HAUSP/USP7 病毒相關(guān)泛素特異性蛋白酶7 規(guī)格 0.2ml
FRA(Human fibronection related antigen) ELISA Kit 人纖維連接素相關(guān)抗原 96T
Phospho-PDPK1(Ser393) 英文名稱： 磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-CREB-1(Ser121) 磷酸化CREB-1 規(guī)格 0.1ml
流式用破膜劑 50T Invitrogen原裝
ZIC3 英文名稱： 內(nèi)臟異位相關(guān)蛋白/鋅指蛋白203 0.2ml
DUSP6 英文名稱： 雙特異性蛋白磷酸酶6/原活化蛋白激酶磷酸酶3 0.2ml
SERPINF2 SerpinF2 鼠單抗 (FITC) Human
Ep300 英文名稱： CREB結(jié)合蛋白p300 0.1ml
早老素蛋白-1 Anti-PS-1 0.2ml
Cullin 英文名稱： CULLIN 0.2ml
Anti-Nadrin DysbindinMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
UPAR 大鼠尿激酶樣纖溶酶原活化物受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Dynamin 2 酶動力蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NAP1L1 核小體組裝蛋白1 規(guī)格 0.2ml
Human terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit 人末端補體復(fù)合物C5b-9 96T
SIRT6 英文名稱： 沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6 0.2ml
