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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4310
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4310 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
山羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | 50T | LZR4310 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
大腸埃希菌拉丁屬名: coli
刺孢小克銀漢霉拉丁屬名: Cunninghamella echinulata
地衣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus licheniformis
山茶刺盤孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
枯草芽孢桿菌枯草亞種拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
淡紫擬青霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
耐堿刺放線孢菌拉丁屬名: Spinactinospora alkalitolerans
Bacillus tequilensis注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
粟酒裂殖酵母拉丁屬名: Schizosaccharomyces pombe
黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
乙酸鈣不動(dòng)桿菌拉丁屬名: Acinetobacter calcoaceticus
大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
產(chǎn)氨短桿菌拉丁屬名: Brevibacterium ammoniagenes
果生鏈核盤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
根瘤菌拉丁屬名: Rhizobium tubonense
山羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格ARID1B 英文名稱： 基因結(jié)合蛋白ARID1B 0.2ml
Anti-WNT2B 信號(hào)通路Wnt2BMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MPO-ANCA IgG ELISA Kit 大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-UCP-2 線粒體脫偶連蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GCMA/GCM1 絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCMa 規(guī)格 0.2ml
SDF-1 Beta/CXCL12(Mouse Stromal cell derived factor 1 Beta) ELISA kit 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β 96T
NAT2 英文名稱： N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶2 0.1ml
CD82 英文名稱： 轉(zhuǎn)移抑制蛋白1 0.1ml
Anti-Phospho-Merlin (Ser518) 磷酸化2型神經(jīng)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Gamma-ECS(Human Gamma-glutamyl systeine synthetase) ELISA Kit 人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-NR2C/NMDAR2C 谷氨酸受體2CMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh IGF2BP2/IMP2 樣生長因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白2 規(guī)格 0.2ml
IFN Alpha-Ab(Human Interferon AlphaAntibody) ELISA Kit 人抗α干擾素 96T
PGP9.5 英文名稱： 神經(jīng)細(xì)胞胞漿蛋白9.5(蛋白基因產(chǎn)物9.5) 0.1ml
IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β(白細(xì)胞介素-1β)(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CD184/CXC-R4 細(xì)胞表面趨化因子受體4Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh PANK1 泛酸激酶1 規(guī)格 0.2ml
HSPB1 Kit Human 人 HSP27 / HSPB1 ELISA配對 ELISA
Transferrin 英文名稱： 轉(zhuǎn)鐵蛋白/血清鐵傳遞蛋白 0.1ml
Cdc25C 英文名稱： 細(xì)胞分裂周期蛋白25C 0.2ml
Anti-CD184/CXC-R4 細(xì)胞表面趨化因子受體4Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
CXCL16 英文名稱： CXC趨化因子16 0.1ml
Anti-Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型病毒血凝素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Col III (Human Collagen Type III ) ELISA KIT 人Ⅲ型膠原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-IFI16/p16 γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAP3K8/TPL2 原活化蛋白激酶激酶8 規(guī)格 0.2ml
ADH(Human alcohol dehydrogenase) ELISA Kit 人乙醇脫氫酶 96T
phospho-Ret(Tyr1062) 英文名稱： 磷酸化原癌基因酪酸蛋白激酶受體RET 0.1ml
