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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

惡臭假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas putida

釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

樟疫霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

葡萄球菌屬拉丁屬名: Staphylococcus  sp.

大肥菇拉丁屬名: Agaricus bitorquis

假單胞菌屬拉丁屬名: Pseudomonas avellanae

鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces sp.

陰溝腸桿菌拉丁屬名: Enterobacter cloacae

釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

血鏈球菌拉丁屬名: Streptococcus sanguinis

短裙竹蓀2-1注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

腫大地桿菌拉丁屬名: Terrabacter tumescens

白色念珠菌拉丁屬名: Candida albicans

茶盤長孢*拉丁屬名: Gloeosporium theae-sinensis T. Miyake

雜色曲霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
蝦源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Claudin 16 英文名稱： 緊密連接蛋白16 0.1ml

Anti-CTR1/Calcitonin receptor 降鈣素受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

NT-3 人神經營養(yǎng)素-3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Cyclin D1 周期素D1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh NFX1 核轉錄因子X盒結合蛋白1 規(guī)格 0.2ml

Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit 人降解加速因子 96T

TNF-alpha(1F6) 英文名稱： 壞死因子-α單克隆 0.1ml

CDC10 英文名稱： 細胞周期調控因子10 0.2ml

Anti-Phospho-Torc2/Crtc2 (Ser171) 磷酸化CREB轉錄共激活因子TORC2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

REG-4(Human regenerating gene IV ) ELISA Kit 人再生基因蛋白IVMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-phospho-PAK2(Ser141) 磷酸化p21激活激酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HPCL2 植烷酰輔酶A羥化酶2 規(guī)格 0.2ml

APSA(Human Anti-phosphatidyl serine antibody) ELISA Kit 人抗磷脂酰絲酸 96T

Phospho-PKM2 (Tyr105) 英文名稱： 磷酸化酸激酶M2 0.1ml

小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA Kit特價促銷

小鼠可溶性內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit特價促銷

小鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 ELISA Kit特價促銷

cAMP 人環(huán)-磷酸腺苷Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CK15 細胞角蛋白15Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NSE/ENO2/γ Enolase 神經元特異性烯醇化酶 規(guī)格 0.1ml

Freund's Adjuvant Complete 弗氏完全佐劑(美國SIGMA) 10ml

CXorf21 英文名稱： X染色體開放閱讀框21 0.2ml

Anti-fatty acid elongase 脂肪酸延長酶Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml

human-VEGF-D 大鼠內皮生長因子DMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-DP-I 橋粒斑蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NARF 核纖層蛋白A識別因子 規(guī)格 0.2ml

Human coagulation factor II ,F II ELISA Kit 人凝血因子Ⅱ 96T

phospho-SLC29A4 (Tyr198) 英文名稱： 磷酸化腦質膜單胺轉運蛋白PMAT 0.1ml