產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4325 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
杏仁源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 | 50T | LZR4325 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
大斑凸臍蠕孢拉丁屬名: Exserohilum turcicum
枯草芽孢桿菌枯草亞種拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
葡萄座腔菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
短小芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus pumilus
菊池鏈格孢用途: 植物病原物,為該病防治提供依據。
鏈球菌(不定種)拉丁屬名: sp.
大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
蠟樣芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus cereus
羅倫隱球酵母羅倫變種拉丁屬名: Cryptococcus laurentii var. laurentii
谷氨酸棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
癭青霉拉丁屬名: Penicillium fellutanum
釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
頂青霉拉丁屬名: Penicillium corylophilum
白靈側耳注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
干酪乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus casei
杏仁源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 DLP1 英文名稱: 動力相關蛋白1 0.1ml
Anti-Acinus AcinusMulti-class antibodies規格: 0.2ml
EpCAM 英文名稱: 上皮細胞粘附分子 0.1ml
鈣介質素 Anti-caldesmon 0.1ml
Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462)/FITC 熒光素標記磷酸化馬鈴薯球蛋白(性硬化)IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HSP27 (Ser82) 磷酸化熱休克蛋白27 規格 0.1ml
cath-L/CL peptide 組織蛋白酶L抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Cdc23 英文名稱: 細胞分裂周期蛋白23 0.2ml
Anti-Gastrin 胃泌素/蛙皮素Multi-class antibodies規格: 0.1ml
CTX- I (Human C-telopeptide of type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型膠原C端肽Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Phospho-HSL (Ser552) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MATK 酪氨酸蛋白激酶細胞分裂素 規格 0.2ml
GCK(Human glucokinase) ELISA Kit 人葡萄糖激酶 96T
RNF15 英文名稱: 環指蛋白15 0.2ml
ASIC3 英文名稱: 酸敏感離子通道蛋白3 0.1ml
Anti-Ack1/FITC 熒光素標記Ack1IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
F VIII Ag(Mouse Factor VIII -related Antigen) ELISA Kit 小鼠第八因子相關抗原Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-CD57/FITC 熒光素標記抗CD57IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DPY19L2 DPY19L2蛋白 規格 0.2ml
TOXO IgG 弓形蟲 IgG(間接法二步法)
Mineralocorticoid receptor 英文名稱: 鹽皮質激素受體 0.2ml
Cyclin B1 英文名稱: 周期素B1 0.1ml
Anti-Nm23-H1 抑制基因Multi-class antibodies規格: 0.1ml
poly-IgR(polyimmunoglobulinreceptor) ELISA Kit 人多免疫球蛋白受體Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-phospho-c-Raf (Ser259) 磷酸化原癌基因c-RafMulti-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HACE1 E3泛素蛋白連接酶HACE1 規格 0.2ml
C4(Mouse Complement 4) ELISA Kit 小鼠補體蛋白4 96T
PAFR 英文名稱: 血小板活化因子受體 0.1ml