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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
鱈魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR4327
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-01-17
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR4327
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

規格

貨號

鱈魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

50T

LZR4327

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

土曲霉拉丁屬名: Aspergillus terreus Thom

納地青霉拉丁屬名: Penicillium nalgiovense

凍干粉 產氣莢膜梭菌計數注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

葡萄座腔菌屬注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

粉狀畢赤酵母拉丁屬名: Pichia farinosa

Bacillus siamensis 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

pBluescript II拉丁屬名: pBluescript II

產黃青霉拉丁屬名: Penicillium chrysogenum

美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: Monilinia fructicola

大腸埃希菌拉丁屬名: coli

熱帶假絲酵母拉丁屬名: Candida  tropicalis

黃隱球酵母拉丁屬名: Cryptococcus flavus

哈茨木霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

檸檬兩面神菌拉丁屬名: Janibacter melonis
鱈魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit進口/原裝

adiponectin(humen) 人脂聯素Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-CK20 細胞角蛋白20Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh NRP1/CD304 神經纖毛蛋白1 規格 0.1ml

processing solution 顯影液試劑 200ml

TRF2 英文名稱: 端粒結合蛋白2 0.1ml

C7orf10 英文名稱: 7號染色體開放閱讀框10 0.2ml

CDC27 英文名稱: 后期促進復合蛋白3 0.1ml

Anti-Gelsolin 凝溶膠蛋白Multi-class antibodies規格: 0.2ml

sE-selectin(Human soluble E-selectin) ELISA Kit 人可溶性E選擇素Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-GDF8/MSTN 生長分化因子8Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Guinea pig IgG/FITC FITC標記的小鼠抗豚鼠IgG 規格 0.1ml

cTn- I (Human cardiac troponin I ) ELISA Kit 人心肌肌鈣蛋白Ⅰ 96T

Phospho-RSK2(Tyr529) 英文名稱: 磷酸化核糖體S6激酶RSK2 0.1ml

ATF6 英文名稱: 活化轉錄因子6 0.1ml

Anti-Phospho-Na,K-ATPase alpha-1 (Tyr10) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

ADP(Mouse adiponectin) ELISA Kit 小鼠脂聯素Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-CD117/FITC 熒光素標記CD117IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Donkey Anti-rabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的驢抗兔IgG 規格 0.1ml

Mouse serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit 小鼠絲酸/蘇酸蛋白磷酸酶 96T

MIER2 英文名稱: 中胚層誘導早期反應蛋白2 0.2ml

Cyclin C 英文名稱: 周期素C 0.1ml

Anti-Nm23-H2 抑制基因Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Human Lyme IgG ELISA Kit 人萊姆IgGMulti-class antibodies規格: 48T

Anti-Integrin beta 1/CD29 整合素β1Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh LEF-1 淋巴增強因子-1 規格 0.1ml

TSH(Human Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit 人促甲狀腺素 96T

PACRG 英文名稱: 麻瘋病和共同調節蛋白 0.2ml

 


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