|
- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4329
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-01-17
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4329 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 | 50T | LZR4329 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
尖孢鐮刀菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
慢生根瘤菌用途: 與胡枝子共生固氮
擴展食烴菌拉丁屬名: Hydrocarboniphaga effusa
泡盛曲霉拉丁屬名: Aspergillus awamori
Rosetta(DE3)規(guī)格: 冰袋泡沫盒快遞
腸膜明串珠菌拉丁屬名: Leuconostoc mesenteroides
梭菌拉丁屬名: septicum
生活飲用水大腸埃希氏菌質(zhì)控樣品規(guī)格: 100～2000 MPN/100mL 6mL西林瓶，凍干粉
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
黏液桿菌拉丁屬名: Mucilaginibacter polytrichastri
堅強芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
馬賽菌拉丁屬名: Massilia eurypsychrophila
猴頭菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
德里腐霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
類芽胞桿菌屬拉丁屬名: Paenibacillus sp.
羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 人白喉(Diphtheria Ab)ELISA試劑盒英文名稱：Human Diphtheria antibody ELISA Kit特價促銷
人白介素1(IL-1)ELISA試劑盒英文名稱：Human Interleukin 1，IL-1 ELISA Kit進口/原裝
人白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Interleukin 10，IL-10 ELISA Kit 進口/原裝
人白介素11(IL-11)ELISA試劑盒英文名稱：Human Interleukin 11，IL-11 ELISA Kit 進口/分裝
人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒英文名稱：Human Interleukin 12，IL-12/P40 ELISA Kit 特價供應(yīng)
Lingo-1 Nogo受體作用蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-AIF 調(diào)亡誘導(dǎo)因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
CDC34B 英文名稱： 泛素載體蛋白R2 0.2ml
Anti-GRO Alpha/GRO-1 生長調(diào)節(jié)致癌基因-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
NRG-1(human Neuregulin 1) ELISA Kit 人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型病毒血凝素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MMP-13 基質(zhì)金屬蛋白酶13 規(guī)格 0.1ml
HO-1(Human heme oxygenase 1) ELISA Kit 人血紅素氧合酶1 96T
RING1 英文名稱： 環(huán)指蛋白1 0.2ml
人組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒英文名稱：Human Tissue Polypeptide Antigen，TPA ELISA Kit進口/原裝
人組織相容性2-K1-K 區(qū)(H2-K1)ELISA試劑盒英文名稱：human Histocompatibility 2-K1-K region，H2-K1 ELISA Kit進口/分裝
人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒英文名稱：Human Tissue-type Plasiminogen Actilyse，t-PA ELISA Kit進口/原裝
人組織因子(TF)ELISA試劑盒英文名稱：Human Tissue factor，IF ELISA Kit特價促銷
EGF 人表皮生長因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Cortactin 皮層肌動蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NOC2L NOC2家族樣蛋白 規(guī)格 0.2ml
Cyclin D2 英文名稱： 周期素D2 0.1ml
Anti-NKR(Neuromedin B Receptor) 神經(jīng)激肽B受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
OGP(Human Osteogenic Growth Peptide) ELISA Kit 人成骨生長肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MCP-1/CCL2 單核細胞趨化蛋白1(大、小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh KARS2/Lysyl tRNA synthetase 賴氨酸t(yī)RNA的連接酶 規(guī)格 0.2ml
Lep IgG(Human Leptospira IgG) ELISA Kit 人鉤端螺旋體IgG 96T
PIK3 gamma 英文名稱： 磷脂酰肌醇激酶PIK3-γ 0.2ml
