- 品牌:聯祖
- 產地:進口、國產
- 貨號:LZR4332
- 價格: ¥3800/盒
- 發布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-01-17
產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4332 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
羽扇豆源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應商 | 50T | LZR4332 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:
蘋果殼囊孢用途: 代謝產物
栗疫菌拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
霍亂弧菌拉丁屬名: Vibrio cholerae
大禿馬勃*拉丁屬名: Calvatia gigantea
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長裙竹蓀注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
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雜色曲霉原變種拉丁屬名: Aspergillus versicolor var. versicolor
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金黃殼囊孢菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
谷氨酸棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
大團囊蟲草注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
蕈狀芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
羽扇豆源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒供應商Aromatase 英文名稱: 芳香化酶/細胞色素P450/雌激素合成酶 0.1ml
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Rotavirus IgM 輪狀病毒 IgM(間接法二步法)
MMP19 英文名稱: 基質金屬蛋白酶18/19 0.2ml
CDC4 英文名稱: 抑制因子FBW7 0.2ml
Anti-MO25 alpha/CAB39 鈣結合蛋白39Multi-class antibodies規格: 0.2ml
F X III (Human coagulation factor X III ) ELISA Kit 人凝血因子ⅩⅢMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-prox-1 prox-1Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HDAC12 組蛋白去乙酰化酶12 規格 0.2ml
AQP-5 ELISA Kit 大鼠水通道蛋白5 96T
PAR-2 英文名稱: 蛋白酶激活受體-2 0.1ml
Angiotensin II Type 1 Receptor 英文名稱: 緊張素Ⅱ-1型受體 0.1ml
Anti-5-HTR1B /FITC 熒光素標記5-羥色胺受體1BIgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
IL-17 ELISA KIT 大鼠白介素17Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-AGEs/FITC 熒光素標記晚期糖基化終末產物IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FBXO38 F-box蛋白38 規格 0.2ml
Apo-H ELISA Kit 大鼠載脂蛋白H 96T
MGAT5 英文名稱: 糖蛋白GNTVA 0.2ml
Cyclin E 英文名稱: 周期素E 0.2ml
Anti-MOG 髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白Multi-class antibodies規格: 0.2ml
HG(Human Herpes Gestation) ELISA Kit 人Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-AKT2 蛋白激酶B2Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Headpin/SERPINB13 絲氨酸蛋白酶抑制劑13 規格 0.2ml
Alpha1-AGP(Human Alpha1-Acid glycoprotein) ELISA Kit 人α1酸性糖蛋白 96T
p47 英文名稱: 血小板47蛋白 0.2ml