產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4188 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
斯氏毛探針法熒光定量PCR試劑盒供應商 | Trichomonas stableri | LZR4188 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
非洲黑蛋巢VB12 (Vitamin B12) ELISA Kit拉丁屬名: Cyathus africanus
花臉香蘑VC (Vitamin C) ELISA Kit拉丁屬名: Lepista sordida
RhodoligotrophosVD (Vitamin D) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodoligotrophos jinshengii sp/ nov/
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大鎖銀耳25-HVD3 (25-Hydroxy Vitamin D3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
球形節桿菌DHVD3 (1,25-Dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter globiformis
雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)VD4 (Vitamin D4) ELISA Kit拉丁屬名: Agaricus bisporus (Lange) Singer
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白靈側耳(白靈菇)VK1 (Vitamin K1) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus nebrodensis
串珠鐮孢*MEK (Methionine-Enkephalin) ELISA Kit 拉丁屬名: Fusarium moniliforme Sheldon
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平常假絲酵母PGI2 (Prostacyclin) ELISA Kit拉丁屬名: Candida insectamans
單生雞腿10ACSDKP (N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
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人相關弱凋亡誘導因子(TWEAK)ELISA試劑盒英文名稱:Human tumour necrosis factor related weak inducer of apoptosis,TWEAK ELISA Kit進口/原裝
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Tuberin 英文名稱: 馬鈴薯球蛋白(性硬化) 0.2ml
CCNDBP1 英文名稱: 周期素D結合蛋白1 0.2ml
Anti-KSR1 Ras信號轉導KSR1蛋白Multi-class antibodies規格: 0.2ml
T.gondii(Human Toxoplasma Gondii ELISA Kit 人剛地弓形蟲Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Integrin Beta 3/CD61 整合素β3Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh LDL 規格 0.1ml
f- BetahCG(Human free chorionic gonadotropin) ELISA KIT 人游離β絨毛膜激素 96T
PISD 英文名稱: 磷脂酰絲酸脫羧酶PISD 0.2ml
Beta cellulin 英文名稱: β細胞素 0.2ml
Anti-PH-4/P4H-TM 脯氨酸水解酶4Multi-class antibodies規格: 0.2ml
FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor) 成纖維細胞生長因子-7/纖維母細胞生長因子 (抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-CD105/Endoglin CD105Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PAX1 配對盒基因1 規格 0.1ml
NRP2 Kit Human 人 Neuropilin-2 / NRP2 ELISA配對 ELISA
Thrombin light chain 英文名稱: 凝血酶(凝血因子II)輕鏈 0.1ml
CPA1 英文名稱: 胰羧肽酶A1 0.1ml
Anti-nectin 2/CD112 細胞黏附分子CD112Multi-class antibodies規格: 0.2ml
PLC Gamma1(Human Phospholipase C Gamma1) ELISA Kit 人磷酯酶Cγ鏈Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-NCoR1 核受體輔助抑制因子1Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-6 白介素6 規格 0.1ml
MMP-7 ELISA kit 大鼠基質金屬蛋白酶7 96T
phospho-P53(Ser392) 英文名稱: 磷酸化抑制基因P53 0.1ml