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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
溶藻弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR4231
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-01-17
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR4231
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

溶藻弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Vibrio alginolyticus

LZR4231


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

孟氏假單胞菌DHVD3 (1,25-Dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas mandelii

HIV假病毒 Z20-11VD4 (Vitamin D4) ELISA Kit規格: 1mL

紡錘形賴氨酸芽孢桿菌VE (Vitamin E) ELISA Kit拉丁屬名: Lysinibacillus  fusiformis

卷枝毛霉VK1 (Vitamin K1) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor circinelloides

巨型艾美耳球蟲MEK (Methionine-Enkephalin) ELISA Kit                                                                                                                                                                                                 拉丁屬名: maxima

谷氨酸棒桿菌LEK (Leucine-Enkephalin) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

草菇PGI2 (Prostacyclin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

金黃色葡萄球菌ACSDKP (N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

銅綠假單胞菌HYD (Hydrocortisone) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  aeruginosa

構巢曲霉LPS (Lipopolysaccharides) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus nidulans

家園鬼傘GSH (Glutathione) ELISA Kit用途: 資源真菌

杏鮑菇LAM (Lipoarabinomannan) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

蘇云金芽孢桿菌8-OHdG (8-Hydroxydeoxyguanosine) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus thuringiensis

熱帶頭梗霉OT (Oxytocin) ELISA Kit拉丁屬名: Cephaliophora tropica

香蕉Cortisol ELISA Kit用途: 植物病原菌
溶藻弧菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit進口/原裝

大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit進口/原裝

大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Leukotriene C4,LT-C4 ELISA Kit進口/分裝

ER- Alpha(phospho-Tyr537)peptide 磷酸化雌激素受體α抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg

極光激酶B Anti-Aurora B 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Thr693) 磷酸化表皮生長因子受體 規格 0.1ml

D-MEM/F-12培養基(原裝) 10×1L Gibco

CD2 英文名稱: CD2 0.1ml

Anti-DNA PKcs DNA依賴蛋白激酶催化亞基Multi-class antibodies規格: 0.2ml

M-CSFR(Human Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptor,M-CSFR) ELISA Kit 人巨噬細胞集落刺激因子受體Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-FOXJ1/HFH-4 叉頭蛋白J1Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的小鼠抗兔IgG 規格 0.1ml

SM(Human sphingomyelin) ELISA Kit 人鞘磷脂 96T

SP-A 英文名稱: 肺表面活性蛋白A 0.1ml

CHCHD5 英文名稱: 卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD5 0.2ml

Anti-CD72/Ly-32 CD72蛋白Multi-class antibodies規格: 0.2ml

SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2) 磷酸鈉協同轉運蛋白抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Anti-Bmi1/PCGF4 組蛋白相關Bmi1Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PGBD3 PGBD3蛋白 規格 0.2ml

EGFR 表皮生長因子受體 濃縮液 0.1ml 進口分裝

THEG4/C1orf223 英文名稱: 高表達蛋白4 0.1ml

Crkl 英文名稱: 接頭蛋白CrkL 0.2ml

Anti-PI3K p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶Multi-class antibodies規格: 0.1ml

GSH-Px(Human Glutathione peroxidase) ELISA Kit 人谷胱甘肽過氧化酶Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-MC-1R 黑皮質素-1受體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Junctophilin 3 連接蛋白JPH3 規格 0.2ml

ADV-Ag(Human Adenovirus Antigen) ELISA Kit 人腺病毒抗原 96T

phospho-p107(Thr369) 英文名稱: 磷酸化視網膜母細胞瘤樣蛋白p107 0.1ml

 


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