產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR4263 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
乳酸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | LZR4263 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
黑曲霉拉丁屬名: Aspergillus niger
粘質沙雷氏菌拉丁屬名: Serratia marcescens
褶皺曲霉拉丁屬名: Aspergillus rugulosus
產灰色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces cinerochromogenes
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檸條根瘤菌用途: 與檸條共生固氮
檸檬兩面神菌拉丁屬名: Janibacter melonis
粉紅聚端孢霉用途: 代謝產物
松杉靈芝注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
雙孢蘑菇拉丁屬名: Agaricus bisporus
雙孢蘑菇注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
榛針孢酵母拉丁屬名: Nematospora coryli
平菇—465用途: 食用菌
玫瑰單胞菌拉丁屬名: Roseomonas eburnea?sp. nov.
糙皮側耳拉丁屬名: Pleurotus ostreatus
乳酸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書C8orf58 英文名稱: 8號染色體開放閱讀框58 0.2ml
Anti-CK7 細胞角蛋白7Multi-class antibodies規格: 0.2ml
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Anti-CITED1/ABCC1 結合轉化激活因子CITED1Multi-class antibodies規格: 0.2ml
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Goat serum 封閉用正常山羊血清(原液) 5ml
THOC2 英文名稱: 轉錄因子THOC2 0.2ml
CD38 英文名稱: CD38 0.1ml
Anti-NeuroD1 神經元分化因子1Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 小鼠角化細胞因子/雙調蛋白Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-BSP/FITC 熒光素標記骨涎蛋白IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EpCAM/CD326 上皮特異性抗原 規格 0.1ml
D2D (Rabbit D-Dimer) ELISA Kit 兔子D二聚體 96T
phospho-p38 MAPK (Tyr323) 英文名稱: 磷酸化p38MAPK 0.1ml
DAPL1 英文名稱: 凋亡相關蛋白激酶樣蛋白1 0.2ml
細胞死亡調解子 Anti-Bim 0.1ml
EFR3A 英文名稱: EFR3A蛋白 0.2ml
Toll樣受體2 Anti-TLR2 0.1ml
Anti-TNFAIP3 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠壞死因子α誘導蛋白3IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-KCNC1(Ser503) 磷酸化離子通道蛋白Kv3.1 規格 0.1ml
PDGF-R-B 血小板源性生長因子受體-B(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
CST9 英文名稱: 胱抑素9/半胱酸蛋白酶抑制劑9 0.2ml
Anti-phospho-FAK (Ser732) 磷酸化粘著斑激酶Multi-class antibodies規格: 0.1ml
ADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 ) 新型金屬基質蛋白酶(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-ICOS-L/B7-H2/CD275 誘導協同刺激分子配體CD275Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ADRB2 (Ser261) 磷酸化腎上腺素能受體β2 規格 0.1ml
Macrophage 巨噬細胞 濃縮液 0.1ml 進口分裝
SLC22A11 英文名稱: 尿酸鹽重吸收轉運子1 0.2ml