血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產品名稱
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規格
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檢測方法
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貨號
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H輔酶ⅡNADP測試劑盒微量法
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100管/48樣
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微量法
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LZ-01349S
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商品介紹:
測定意義
輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,NADP+和NADPH含量測定可以計算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應密切相關。NADPH/NADP+比值不僅是細胞氧化還原態的主要標志之一,而且在PPP途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調控作用。
測定原理
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP+和NADPH。NADPH通過PMS的遞氫作用,使氧化型噻唑藍(MTT)還原為甲瓚,570nm下檢測吸光值,從而測定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP+為NADPH,從而檢測NADP+含量。
所需的儀器和用品
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
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實驗通用規則:
1、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
2、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
3、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
4、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5、實驗時,要使底物避光保存。
6、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。
8、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
10、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。
SOST Others Rat 大鼠 SOST / Sclerostin 人細胞裂解液 (陽性對照) 依魯替尼(PCI32765)質量規格:>98%,BTK抑制劑Ibrutinib,PCI-32765
人張氏肝細胞;Chang liver右旋蘭索拉唑(標準品)質量規格:含量測定,標準品(R)-Lansoprazole
IL17RC Others Human 人 IL17RC (aa 1-454) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 右旋蘭索拉唑質量規格:>99%,BR(R)-Lansoprazole
恒河猴腎細胞;RM-3樂伐替尼質量規格:>98%,VEGFR抑制劑Lenvatinib(E7080)
HuT78細胞,T細胞細胞 惡性色素瘤,A375細胞 EB病毒轉化的人B細胞;HH-015-硝基吲哚(>98.0%(GC))質量規格:>98.0%(GC)5-Nitroindole
平滑肌細胞培養基SMCM-prf3,5-二扶/3,5-二扶嘧啶,英文名或英文縮寫:3,5-Difluoropyridine,級別:CP,規格:500克
TOV-112D細胞,人上皮性細胞 人腎小管近段上皮細胞,HK-2細胞 子宮內膜上皮細胞Many types of
cells包裝:5 × 105方(1ml)四甘醇 Tetraglycol
31692-85-0 100G 通用試劑
豬腎細胞;PK(15)氧化鑭 LcnthcnuM oxidq;LcnthcnuM
trioxidq;LcnthcnuM sqsquioxidq 131-81-8
PIGR Others Human 人 PIGR 人細胞裂解液 (陽性對照) 鈉測試盒(帶標準)shēng huà shì jì容量:RT10個
CM-M047小鼠腸微細胞完全培養基100mL7782-92-5基鈉(*)wo7ium amide
人胚胎;WI-38 人腸微內皮細胞完全培養基 100mL羅哌卡因-d7Ropivacaine-d7質量規格:美國進口
人小細胞細胞;NCI-H446羅哌卡因鹽酸鹽-d7Ropivacaine-d7 質量規格:美國進口
TNFRSF1B Others Cynomolgus 食蟹猴 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 人細胞裂解液 (陽性對照) 羅舒伐他汀內酯Rosuvastatin
Lactone質量規格:美國進口
人胃粘膜上皮細胞完全培養基 100mL(3R,5R)-羅舒伐他汀(3R,5R)-Rosuvastatin質量規格:美國進口
MFC細胞,小鼠細胞 BHK(幼倉鼠腎細胞) 獼猴肺細胞;MML2羅舒伐他汀酰基-β-D-葡萄糖苷酸Rosuvastatin
Acyl-β-D-glucuronide質量規格:美國進口
H輔酶ⅡNADP測試劑盒微量法SIAE Others Human 人 sialate O-acetylesterase
/ SIAE 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2-硝基本,英文名或英文縮寫:2-nitnoaniline,級別:高,88%,規格:5克
CL-0405NCI-H716(人結直腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2流醋博來每速 BlqoMycin
Sulfctq 9041-93-4
人羊膜間充質基質細胞 Sars蛋白表達株,293001A細胞 NCI-H596 [H596](人細胞)鈦黃,英文名或英文縮寫:Titan yellow,級別:生物技術級,規格:1克
人肺鱗癌細胞;NCI-H520RNAELECTROPHORESISKITRNA電泳試劑盒01 KitRT
HAVCR1 Others Rat 大鼠 KIM1 / TIM1 / HAVCR1 人細胞裂解液 (陽性對照) (營養肉湯)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。