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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
LPO脂質(zhì)過(guò)氧化物測(cè)試劑盒可見(jiàn)分光光度法
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:國(guó)產(chǎn)
  • 型號(hào):100管/96樣
  • 貨號(hào):LZ-01410S
  • 發(fā)布日期: 2020-12-02
  • 更新日期: 2025-01-17
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 國(guó)產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZ-01410S
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
英文名稱
包裝規(guī)格 100管/96樣
純度 %
CAS編號(hào)
別名 線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)測(cè)試盒
分子式
是否進(jìn)口

血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

LPO脂質(zhì)過(guò)氧化物測(cè)試劑盒可見(jiàn)分光光度法

100/96

熒光法

LZ-01410S

商品介紹:

測(cè)定意義
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過(guò)氧化氫、及其下游產(chǎn)物過(guò)氧化物和羥化物等,研究表明,機(jī)體95%以上的活性氧(ROS)都來(lái)自于線粒體,其失衡所致的氧化應(yīng)激與細(xì)胞生長(zhǎng)增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過(guò)程有關(guān)。

正常情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)與氧自由基處于平衡狀態(tài),細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平維持在較低的生理范圍;在病理情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng)與氧自由基的平衡被打破,細(xì)胞內(nèi)活性氧水平過(guò)多,就可破壞線粒體酶類、脂類和核酸,使機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激,同時(shí),活性氧還可攻擊線粒體DNA產(chǎn)生氧化損傷,導(dǎo)致線粒體ATP合成減少、線粒體膜電位破壞等結(jié)構(gòu)和功能變化。

因此,通過(guò)檢測(cè)活性氧的變化來(lái)判斷線粒體的功能是否正常具有重要意義。

測(cè)定原理:

熒光探針-還原型二氯熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可擴(kuò)散通過(guò)線粒體膜,在線粒體內(nèi)被酯酶水解,形成無(wú)熒光的DCFHDCFH迅速與ROS反應(yīng)生成熒光物—氧化型二氯熒光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF) 根據(jù)上述原理設(shè)計(jì)了利用熒光法直接定量檢測(cè)線粒體ROS產(chǎn)生速率的方法。將熒光強(qiáng)度隨時(shí)間變化的數(shù)據(jù)點(diǎn)擬合,線性回歸直線斜率與ROS產(chǎn)生的速率呈正比。

需自備的儀器和用品:

多功能酶標(biāo)儀、恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
2、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
3、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
5、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
6、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
10、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。

選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。

操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

SERPINF2 Others Mouse 小鼠 SerpinF2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-三苯甲基洛沙坦(洛沙坦雜質(zhì)H)質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口N-Trityl Losartan (Losartan Impurity H)

軟骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)洛沙坦-d3質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Losartan-d3

JTB Others Human 人 Jumping anslocation Breakpoi / JTB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 羧酸洛沙坦質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Losartan Carboxylic Acid

615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性瘤株;L615洛沙坦質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Losartan Carboxaldehyde

SK-LU-1細(xì)胞,人低分化 大鼠腎成纖微細(xì)胞,NRK-49F細(xì)胞 CL-0106HFL1(人)5×106cells/瓶×2MQAE(氯離子熒光探針)質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium bromide
NCI-H1703[H1703]細(xì)胞,人細(xì)胞 人細(xì)胞,5637(HTB-9)細(xì)胞 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞HRPEpiCStearicAcid脂蠟酸100克CP,98.5%

貂源細(xì)胞1-錄代;α-錄代 1-Chloroncphclqnq

MMP7 Others Human 人 MMP7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Fraser添加劑shēng huà shì jì容量:1米

CM-R052大鼠細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLRuDP1,5-二嶙酸-D-核酮糖5克BR,98%

RSPO2 Others Human 人 FTLS / RSPO2 (186 Leu/Pro) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3153-37-54-錄, 98%metxyl 4-chlorobutyrate
人腺泡上皮癌;HPAC滅草煙,咪唑煙酸Imazapyr acid質(zhì)量規(guī)格:>98%

EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK (aa 563-987) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 咪唑煙酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Imazapyr acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞石膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Lithocholic Acid質(zhì)量規(guī)格:>97(GC),標(biāo)準(zhǔn)品

rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞 [CIP 104786]細(xì)胞 293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞)氧嗪酸鉀Potassium Oxonate質(zhì)量規(guī)格:>98%

人T瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞;Jurkat D,E氧嗪酸鉀(標(biāo)準(zhǔn)品)Potassium Oxonate質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
LPO脂質(zhì)過(guò)氧化物測(cè)試劑盒可見(jiàn)分光光度法CM-R097大鼠皮下脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-叔丁氧羰基-L-酸,英文名或英文縮寫:BOC-L-Alanine,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:25克

CTLA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CTLA4 / CD152 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-錄-2,2-二基炳醋 99% 3-CHLORO-2,2-DIMqTHYLPROPIONIC cCID 13211-38-1

小鼠顆粒細(xì)胞MGCpotewwiumSULFATE,ANxy7noUS無(wú)水鉀ACS級(jí)白色結(jié)晶RTsigma

UI-1細(xì)胞,人細(xì)胞 大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞,IEC-6細(xì)胞 人氣管平滑肌細(xì)胞HTSMC對(duì)羥基本乙鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:Tyramine xy7nochloride,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:5克

HOS(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2134-31-68-羥基鹽;-8-羥基;氧化;奎諾蘇8-xy7noxyinoneoline sulfate;8-inoneopxenol sulfate;Oxine sulfate;inoneosol;Chinosol

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